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婴幼儿配方食品中维生素B1检测分析
Insm_a1d4956c
2023/08/07
私聊
乳制品检测
婴幼儿配方食品中维生素B1检测分析
1.
目的
婴幼儿配方食品中
维生素
B
1
检测
按照
GB 5009.84-2016
《食品安全国家标准
食品中维生素
B
1
的测定
》第一法
高效
液相色谱
法检测维生素
B
1
含量。按照国标要求所用标准品为盐酸硫胺素,即
56.1mg
的盐酸硫胺素相当于
50mg
的硫胺素。在绘制标准曲线过程中,对标准品按照盐酸硫胺素和硫胺素分别进行计算分析
,
并对检验结果进行了分析总结。
2.
仪器与用具
高效
液相色谱仪
(带荧光检测器)
、电子天平、隔膜真空泵、溶剂过滤器、酸度计、立式压力蒸汽灭菌器
、生化培养箱
、锥形瓶、玻璃棒、量筒、滴管、容量瓶、移液管、刻度吸管、滤纸、漏斗、具塞比色管。
3.
试剂
三水合乙酸钠、冰乙酸、甲醇(色谱纯)、
0.01moL/L
盐酸溶液、
0.1mo
L
/
L
盐酸、
2.0m
oL
/
L
乙酸钠溶液、碱性铁氰化钾溶液、正丁醇
、
混合酶溶液。
碱性铁氰化钾溶液:将
5m
L
铁氰化钾溶液
(
20g/L
)
与
200m
L
氢氧化钠溶液
(
100g/L
)
混合,摇匀。临用前配制。
盐酸溶液
(0.1mo
L
/
L
)
:移取
8.5m
L
盐酸,加水稀释至
1000m
L
,摇匀。
盐酸溶液
(0.01mo
L
/
L
)
:量取
0.1mo
L
/
L
盐酸溶液
50m
L
,用水稀释并定容至
500m
L
,摇匀。
乙酸钠溶液(
2.0moL/L
):称取
27.2g
三水合乙酸钠,
用水
溶解
并定容
于
100mL
,
摇匀。
混合酶溶液:称取
1.76g
木瓜蛋白酶、
1.27g
淀粉酶,加水定容至
50m
L
,涡旋,使呈混悬状液体,冷藏保存。临用前再次摇匀后使用
。
标准
品:维生素
B
1
标准品(盐酸硫胺素)。
4.
操作方法
色谱参考条件:
色谱柱
:
C
18
柱,
250mm×4.6mm
,
5μm
,或具有同等性能的色谱柱;
流速:
0.8
m
L
/min
;柱温:
30℃
;
检测波长:激发波长
375nm
,
发射波长
435nm
。
流动相:
流动相
A
(
0.05moL/L
乙酸钠
溶液:称
取三水合乙酸钠
6.80g
,加
900m
L
水溶解,
用冰乙酸调节
pH
为
4.0
~
5.0
之间
,加水
定容
至
1000m
L
,经
0.45μm
微孔
滤膜过滤
后
使用。)
+
流
动相
B
(甲醇)
=65+35
。
试液衍生化
:
准确
移取上清液
和
标准系列工作液
10.0m
L
,加入
5.0m
L
碱性铁氰化钾
溶液
,
涡旋
混匀后,
准确
加入
10.0m
L
正丁醇,
再次涡旋
混匀后静置约
10
分钟
,待
充分分层
后,
吸取正丁醇
相(上层)经
0.45
μ
m
有机微孔膜过滤
,
取滤液
于进样瓶中,
供
分析用。
室温
条件下衍生产物在
4h
内稳定
,操作过程应在避免强光照射的环境下进行。
测定法:
标准
曲线的制作:将标准系列工作液衍生物
20
μ
L
注入高效
液相色谱仪
中,测定相应的维生素
B
1
峰面积
,
以
标准工作液的浓度(
μ
g/mL
)
为
横坐标,
以
峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。
试样
溶液的测定:
将
试样衍生物溶液
20
μ
L
注入高效
液相色谱仪
中,得到维生素
B
1
的
峰面积,根据
标准
曲线计算得到待测液中维生素
B
1
的浓度。
5.
检验结果及数据分析
检测结果如表
1
数据分析:按照
GB 5009.84-2016
中对结果的表述,维生素
B
1
应以硫胺素计,在绘制标准曲线过程中,应将标准品称样量
56.1mg
的盐酸硫胺素折算为
50mg
的硫胺素
后在绘制标准曲线
。对数据进行折算(即原检验结果除以
1.122
)后比对分析,如表
2
:
6.检验结论
检验结果以
盐酸硫胺素和
硫胺素计
进行比对
,
比对结果精密度
≤20%
,
结构符合
GB 5009.84-2016
《食品安全国家标准
食品中维生素
B
1
的测定
》
的要求。
分
该帖子已被
版主-yqfxy
加50积分,加2经验;加分理由:原创
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私聊
zyl3367898
第1楼
2023/10/13
应助达人
检测过程完整。
0
发表回复
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