【前言】联苯胺(4,4-二氨基联苯),是二元弱碱,其化学性质与苯胺相似。联苯胺曾是染料合成的重要中间体,用它可以合成上百种染料,但是他的毒性很强,2017年被世界卫生组织列为1类致癌物。
【关键词】联苯胺;液相色谱法
1.方法原理
样品通过阳离子交换固相萃取柱,联苯胺被吸附,用乙酸溶液将联苯胺锁定在固相萃取柱上,用甲醇淋洗除去杂质,再用氨水甲醇溶液进行洗脱,洗脱液浓缩定容后,用具有荧光检测器的高效液相色谱分离检测,根据保留时间定性,外标法定量。
2、主要仪器设备
高效液相色谱仪
固相萃取仪
旋转蒸发仪
3、试剂和材料
乙腈,色谱纯
甲醇,色谱纯
氨水,优级纯
硫代硫酸钠,分析纯
乙酸,分析纯
氨水,优级纯
乙酸铵,色谱纯
甲醇中联苯胺,1000μg/ml
4、样品
4.1样品采集
采样前,向样品瓶中加入硫代硫酸钠,每500ml样品加入50mg。采样时,使样品充满采样瓶,不留液上空间。采集的样品在4℃以下冷藏、避光保存。
4.2试样制备
4.2.1固相萃取柱的活化
将固相萃取柱固定在固相萃取装置上,先用5ml甲醇以约2ml/min的流速通过固相萃取柱,在填料暴露于空气之前,向柱子上加入5ml水,待水剩约2ml时,停止活化。
4.2.2富集、净化与浓缩
量取150ml样品置于250ml锥形瓶中,以约2ml/min的流速通过活化后的固相萃取柱,样品完全富集后,加入5ml乙酸溶液(3%,V/V),待乙酸溶液完全流出后,加入8ml甲醇淋洗,待甲醇完全流出后,继续用真空泵抽吸5min。用7ml氨水甲醇溶液(5+95)洗脱,洗脱液收集到浓缩瓶中。然后将浓缩瓶置于氮吹仪上,在60℃浓缩至1ml,再用水定容至2.0ml,混匀后经滤膜过滤到棕色样品瓶中,待测。
4.2.3空白试样的制备
用实验用水代替样品,按照与试样的制备相同步骤进行空白试样的制备。
5、分析步骤
5.1仪器条件
流动相A:乙腈,流动相B:乙酸铵溶液(0.01mol/L),洗脱程序为等度洗脱,流动相A/流动相B=20/80(V/V),流速:1.0ml/min,柱箱温度:40℃;进样量:40μl,荧光检测器的激发波长/检测波长:292nm/395nm;进样体积40μL。
5.2标准溶液配置校准曲线
用微量注射器分别移取适量联苯胺标准液,用甲醇水溶液逐级稀释,制备标准系列,质量浓度分别为2.00μg/L、5.00μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L、100μg/L、200μg/L。按照5.1仪器条件,由低浓度到高浓度依次对标准系列溶液进样,以联苯胺的质量浓度(μg/L)为横坐标,以其对应的峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。
5.3试样测定
按照5.1仪器条件进行试样的测定。
5.4空白试验
按照5.1仪器条件进行空白试样的测定。
6、结果计算与表示
样品中联苯胺的质量浓度ρ(μg/L)按照下面公式进行计算。
式中:ρ——样品中联苯胺的质量浓度,μg/L;
ρ1——由标准曲线得到的试样中联苯胺的质量浓度,μg/L;
V1——试样定容体积,ml。
V——取样体积,ml;
D——稀释倍数。
7、某印染厂废水检测结果
某印染厂废水按照上述步骤采集、同一水样分成3份进行前处理、上机分析,经计算,结果如下:
联苯胺 | 第一份(μg/L) | 第二份(μg/L) | 第三份(μg/L) | 平均值(μg/L) | 相对标准偏差RSD(%) |
0.020 | 0.028 | 0.017 | 0.022 | 25.8 |
参考文献:
液相色谱-串联质谱测定印染废水中联苯胺,李志刚、蒋少军、戴鸽、李碧享;
高效液相色谱-串联质谱法同时测定水中丙烯酰胺、苯胺和联苯胺,熊杰、钱蜀、谢永洪、谢振伟、李海霞;
加压流体萃取-气质联用-内标法测定土壤中24种苯胺类和联苯胺类化合物,杨明、付海美、邵鹏;