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阳性对照

  • Ins_4fb0a7a2
    2023/10/06
  • 私聊

食品毒素/微生物检测

  • 药品日常微生物检验中,每天做的阳性对照实验,加入培养基中阳性菌有没有规定菌液浓度?还是直接用接种环从斜面上随意取一点菌加入培养基中即可?
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  • 小卡

    第1楼2024/10/24

    在药品日常微生物检验中,阳性对照实验加入培养基中的阳性菌是有规定要求的,不能随意用接种环从斜面上取一点菌加入培养基中。
    一般来说,阳性对照菌液浓度应根据具体的检验方法和标准来确定。通常会有以下要求:
    一、菌液制备
    选择合适的阳性对照菌株:根据检验的目的和要求,选择相应的标准菌株作为阳性对照。例如,进行需氧菌总数检查时,可选择金黄色葡萄球菌作为阳性对照菌;进行霉菌和酵母菌总数检查时,可选择白色念珠菌等。
    活化菌株:将保藏的标准菌株接种到适宜的培养基上进行活化,以确保菌株的活性和生长状态良好。活化的条件一般为在特定的温度下培养一定的时间,如金黄色葡萄球菌可在 30 - 35℃培养 18 - 24 小时。
    制备菌悬液:从活化后的斜面培养基上挑取适量的菌落,用适量的稀释液(如生理盐水、磷酸盐缓冲液等)制成菌悬液。菌悬液的浓度应通过适当的方法进行测定和调整,以满足阳性对照实验的要求。常用的方法有比浊法和平板计数法。
    比浊法:使用比浊仪或分光光度计,将菌悬液的浊度调整到与标准比浊管或已知浓度的菌悬液相同的浊度,从而确定菌悬液的大致浓度。
    平板计数法:将菌悬液进行系列稀释,然后取适量稀释液涂布在平板培养基上,培养后计数菌落数,根据稀释倍数计算出原始菌悬液的浓度。通过调整菌悬液的浓度,使其达到规定的阳性对照菌液浓度要求。
    二、菌液浓度要求
    不同的药品微生物检验项目对阳性对照菌液浓度的要求可能会有所不同。一般来说,应根据相应的检验标准和方法进行确定。例如:
    需氧菌总数检查:阳性对照菌液的浓度一般为每毫升含 100 - 1000 个菌落形成单位(CFU/mL)。
    霉菌和酵母菌总数检查:阳性对照菌液的浓度一般为每毫升含 10 - 100 CFU/mL。
    控制菌检查:根据不同的控制菌种类,阳性对照菌液的浓度要求也会有所不同。一般应根据具体的检验方法和标准进行确定,确保阳性对照能够明显生长且易于观察。
    在进行药品日常微生物检验时,必须严格按照规定的方法和要求进行阳性对照实验,以确保检验结果的准确性和可靠性。随意加入不确定浓度的菌液可能会导致阳性对照结果不准确,影响对药品微生物污染情况的判断。

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