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什么是蛋白标签?蛋白标签在重组蛋白生产中有什么作用?
Ins_bf0c01c3
2023/12/08
私聊
生命科学仪器综合讨论
蛋白标签(
Protein Tag
)又称为标签蛋白,是利用
DNA
体外重组技术,将目的蛋白与其融合表达形成的一种多肽或蛋白。这种标签有助于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等操作。随着技术的不断进步,研究人员已经成功开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。然而,由于不同的蛋白标签具有各自的特性,因此在质粒构建过程中常常会遇到多种问题。今天,我们将深入探讨蛋白标签的各个方面。
蛋白标签类型
蛋白标签主要分为三类,适用于不同的应用场景:表位标签、亲和标签和荧光标签。
①表位标签往往是短肽序列,可用于免疫学应用,如
Western Blot
和免疫共沉淀。最常用的表位标签有
His
、
FLAG
、
HA
等。
②亲和标签一般较长,可增加蛋白溶解度,广泛应用于重组蛋白的纯化,如
SUMO
、
Trx
、
MBP
等。
③荧光标签可用于活细胞和死细胞检测,最常用的荧光蛋白包括绿色荧光蛋白(
GFP
)、橙色荧光蛋白(
OFP
)、红色荧光蛋白(
RFP
)和黄色荧光蛋白(
YFP
)。它们被广泛用于影像学研究,如细胞定位和共表达实验。
蛋白标签在重组蛋白生产中有什么作用
?
1
、识别:给蛋白加标签使其易于识别,进而快速鉴定感兴趣的蛋白质。
2
、纯化:利用标签蛋白对目的蛋白进行纯化。例如,
His6
是一种由六个组氨酸残基组成的融合标签,可以插入目的蛋白的
C
末端或
N
末端。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,这使得
His6
标签可用于固定化金属螯合层析
(IMAC)
,从而对重组蛋白进行分离纯化。
3
、定量:通过量化标签来确定目的蛋白的存在量。
4
、定位:通过定位标签蛋白定位到目标蛋白在细胞中的特定位置,进而研究其生理功能、信号通路等。
5
、跟踪:在细胞、组织和生物体中,通过追踪标签蛋白质追踪目的蛋白,以研究它们的表达、分布、代谢等生物学过程。
总之,蛋白标签在重组蛋白生产中扮演着重要的角色,它们不仅提高了生产效率,还为蛋白的检测、纯化和示踪提供了便利。
常用的
蛋白标签
有:
His-Tag
、
FLAG-Tag
、
HA-Tag
、
Myc-Tag
、
SUMO-Tag
、
Trx-Tag
、
GST-Tag
……义翘神州不仅可提供重组蛋白表达定制服务,也可提供对应标签抗体产品及融合蛋白标签切除常用工具酶,如
EK
蛋白酶、
3C
蛋白酶等。下图是具体蛋白标签的序列和大小介绍,详情可以关注:
https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag
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私聊
ztyzb
第1楼
2023/12/08
应助达人
谢谢分享。
1
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