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什么是稳定细胞株？稳定细胞株常见问题解析

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2024/01/31

生命科学仪器综合讨论

稳定细胞，又被称为静止细胞，是那些在生理状态下增殖不明显，处于细胞增殖周期静止阶段的细胞（G0期）。然而，当它们受到组织损伤的刺激时，这些稳定细胞会迅速反应，进入DNA合成前期（G1期），展现出强大的再生能力。它们是维持组织和器官稳态的关键因素。

稳定表达细胞株，也被称为稳定转染细胞株，是一种特殊的细胞株。这些细胞能够持续、稳定地表达特定的基因或干扰特定基因的表达。在生物学和医学研究中，稳定表达细胞株被广泛应用于基因功能研究、药物筛选和疾病模型建立等领域。

稳定细胞株平台的常见问题解答

①若想做稳定细胞株，需提供哪些信息？

客户仅需提供目标蛋白的序列信息和希望表达的目标蛋白的区段，义翘神州技术人员会根据客户要求进行表达风险评估和制定表达纯化策略。常见蛋白序列信息来源包括UniProt和NCBI等数据库。客户也可直接提供编码目标蛋白的核苷酸序列。

②稳定株细胞如何交付？

采用干冰运输，尽可能减少温度波动对细胞造成的影响。

③单克隆和pool怎么选择？

成药蛋白需要单克隆，以便溯源。如只需拿到蛋白/抗体的话，pool即可满足。需要提醒的是，通常情况下，pool产量较单克隆低。

④稳定细胞株做重组蛋白，能否根据蛋白活性进行克隆筛选？

是可以的，只要客户有完整的活性检测方法，我们可以提供minipool供客户进行活性检测（或由义翘进行活性检测）。符合客户对活性的要求后再进行后续的实验。

⑤为什么要构建稳定细胞株？

稳定株一个很大的优势是减小重组表达蛋白的批间差异，并且表达量通常比瞬转高。对于成药性抗体来说，构建稳定细胞株是十分必要的。

⑥为什么稳定细胞株构建周期较长？

稳定株的构建周期长，很大程度是由于要筛选出阳性克隆，并需要对细胞株的稳定性进行检测。

⑦制备稳定株表达蛋白的周期大致如何？

如只需要pool即可，从基因合成到得到纯化后的蛋白，周期一般在7周左右。如需引入多步纯化方案，标签切除，以及额外检测服务则周期会根据具体项目情况有所延长。

义翘神州提供稳定细胞系构建服务，同时提供稳定细胞株构建平台，详情可以关注：https://cn.sinobiological.com/services/platform/stable-cell-line-development

义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索“义翘神州”与我们取得联系。

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