关于AHMT分光光度法的几个疑问，因为要做盲样考核，希望得到解答，谢谢

应助达人

1、做标准曲线时是否该减去0号管吸光度，根据标准方法要求，如果标准方法有要求减，那就必须减，没有要求的话可减可不减。
2、自控样是已知浓度的水中甲醛溶液，那就把自控样当做一个样品，按照标准移取2ml样品至10ml比色管中，然后按照样品处理步骤加入各种试剂。
3、一般盲样都是有作业指导书的，因为你不知道其浓度大小，所以你不知道该取多少，稀释多少倍做。如果真没作业指导书的话，那你开了盲样就需要取一点盲样进行预先测试一下，估计一下大致的浓度，然后再确定合适的取样体积和稀释倍数。

应助达人

1、在做标准曲线时是否该减去0号管吸光度，我看了好几个视频，有减的，有不减的，现在搞不清楚。
楼主用的是GB/T 16129-1995方法吗？根据标准规定的话是不需要减去0号管吸光度的，但是这个标准计算时也没有考虑标曲截距。个人建议您按照目前的环保领域常用的标曲绘制方式：以扣空白后吸光值对样品含量绘制标曲，计算同时考虑标曲截距
2、我买了自控样，是直接吸取2ml自控样按规范操作么？自控样是已知浓度的水中甲醛溶液，并没有吸收液，样品空白是用蒸馏水做么？还是要把自控样用吸收液稀释以后再按规范操作。包括后面进行盲样考核的时候，假如没有作业指导书我该怎么操作。
楼主，一般都会有作业指导书的，不然盲样如何稀释和结果如何报出都不明确。如果您标曲是用吸收液稀释的，样品用实验用水的话不太合适，可能存在基体干扰。
3、做自控样或者最后做盲样时结果处理，采样体积V0、V1、V2各按多少计算？
楼主，一般盲样都是10ml稀释到250ml后使用，报出250ml中的浓度。此时您用不到采样标体V0，V2高概率会是2ml，V1很有可能用不到。建议用(A-A0-a)/b/V*f的公式，其中a是标曲截距，b是标曲斜率，V是分析时取样体积，f是盲样稀释倍数

您好，我遇到了个问题，为什么我现在做0号管会有淡淡的红黄色，然后我用纯水+氢氧化钾+AHMT，也会有一点点淡黄色，加入高碘酸钾以后会变淡淡的红黄色，用AHMT加氢氧化钾也会变色，淡淡的红黄色，试剂除了AHMT溶液和高碘酸钾是买的配置的成品，别的都是现配的，请问是AHMT溶液有问题么？

您好，我遇到了个问题，为什么我现在做0号管会有淡淡的红黄色，然后我用纯水+氢氧化钾+AHMT，也会有一点点淡黄色，加入高碘酸钾以后会变淡淡的红黄色，用AHMT加氢氧化钾也会变色，淡淡的红黄色，试剂除了AHMT溶液和高碘酸钾是买的配置的成品，别的都是现配的，请问是AHMT溶液有问题么？

应助达人

楼主，AHMT法测甲醛一般是有颜色的，您空白具体多少？另标曲线性如何？内控做了吗？
AHMT和高碘酸钾算是关键试剂，对空白和标曲影响比较大；另外还要考虑1、实验用水、器皿和环境条件影响；2、操作严格按标准进行，尤其是振摇操作，避免气泡影响吸光值；3、显色时间要严格控制。

我现在遇到的问题是在不加甲醛溶液的情况下就有显色反应了，我把吸收液换成刚开封的纯水做，也一样有显色反应，正常来说不应该是无色的么，我现在做0号管都会有淡淡的红黄色出现，测吸光度有0.076这么大

应助达人

楼主，理论上应该是无色，但是实际上每个光度法项目空白都会有吸光值的，具体污染源可能是纯水、试剂、玻璃器皿和环境条件。0.076确实有点高了，如果实验用水换了的话考虑从试剂、玻璃器皿和环境条件找原因，试剂可以自行配制，环境条件避开用甲醛的房间，比如二氧化硫吸收液会用到甲醛

我现在遇到的问题是在不加甲醛溶液的情况下就有显色反应了，我把吸收液换成刚开封的纯水做，也一样有显色反应，正常来说不应该是无色的么，我现在做0号管都会有淡淡的红黄色出现，测吸光度有0.076这么大

进来学习一下