【我们不一YOUNG】+水源性致病微生物检测水样前处理方法之磁性分离法

memory光阴

2024/07/18

私聊

前处理综合讨论

磁性分离是以磁性或可磁化的材料作为吸附剂的一种分离富集技术。大多数应用于分离的磁性材料具有超顺磁性,即在通常情况下没有磁力,在外加磁场下可表现出磁性。在没有磁场的情况下可以充分地分散在溶液中,与目标物结合,之后在外加磁场下聚集于容器一侧,通过弃去溶液和重复洗涤来最大限度地去除抑制物。磁性材料只是载体,只有对磁性纳米材料(magnetic nanoparticles,MNPs)进行表面修饰,使其具有抗体、抗生素(万古霉素、达托霉素等)和化合物等识别基团才能捕获目标微生物。

1、免疫磁分离法

免疫磁分离是指用抗体修饰MNPs,基于抗体-抗原相互作用从水体中选择性捕获目标微生物。Guven等用IgE标记的免疫磁珠分离水样中的大肠埃希氏菌, 结合免疫分析技术进行检测, 检出限为8 CFU/mL。Huy等用蛋白A偶联壳聚糖修饰的Fe3O4磁性颗粒结合IgG抗体从浓度低至10 CFU/mL水样中分离出了霍乱弧菌。我国施行的《生活饮用水标准检验方法第12部分: 微生物指标》 (GB/T5750.12—2023) 规定采用免疫磁分离荧光抗体法测定生活饮用水及其水源水中的贾第鞭毛虫孢囊和隐孢子虫卵囊。Villamizar-Gallardo等使用抗轮状病毒单克隆抗体功能化氟MNPs实现了对水中轮状病毒的富集。

2、基于抗生素修饰的磁性分离法

一些抗菌物质能够抗菌是因为能与致病菌表面的一些生物结构相互结合,利用这一特点将其与磁性粒子结合可以起到捕获细菌的作用。Meng等用万古霉素修饰的MNPs捕获水、牛奶和果汁饮料中的金黄色葡萄球菌, 结合流式细胞仪, 检出限为33 CFU/mL。Ding等用抗菌肽功能化MNPs在较低质量浓度下 (0.1 mg/mL) 实现了对致病性革兰氏阴性杆菌的半选择性捕获, 在较高质量浓度下 (0.5 mg/mL) 实现了对自来水和娱乐用水中大肠埃希氏菌的高效捕获, 捕获效率大于97%。

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