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液相色谱(LC)
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【金秋计划】+检测二氯喹啉酸残留,色谱条件:流动相为乙腈:水(V/V)=1:1,水用磷酸调到pH=4;流速1mL/min;波长225nm;进样量20μL。此条件下,标样出峰时间较早,保留时间4min左右,样品峰分不开。调整了流动相比例,乙腈:水(V/V)=1:3,保留时间15min左右,但峰高和峰面积明显降低,且浓度较低时不出峰,怎样解决?
房东的猫
2024/09/09
私聊
液相色谱(LC)
(1)二氯喹啉酸属于弱酸性化合物,在水中的溶解度为0.065mg/L,在甲醇中溶解性比乙腈要好(难溶于乙腈),问题产生的原因可能是目标物在乙腈中溶解度低,可以考虑改用甲醇和水作为流动相。
(2)二氯喹啉酸的pKa值为4.35,对于弱酸性物质一般流动相pH值的选用原则是最好小于等于其pKa值两个单位,以保证待测物99%以上呈分子状态,否则容易产生峰拖尾、峰分叉等现象。而原水相部分pH=4,和二氯喹啉酸pKa值很接近,该条件下,二氯喹啉酸处于分子、离子形态各占一半的混合状态,不利于二氯喹啉酸在色谱柱上的保留,可能会影响目标物峰型。兼顾目标物pKa值和色谱柱pH耐受范围,建议将流动相pH调节至2~3来优化实验。
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