仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
1
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
实验室建设/管理
>
实验室管理/LIMS
>
帖子详情
【金秋计划】如何利用同位素提高线性上限
Ins_ac2ecace
2024/09/12
私聊
实验室管理/LIMS
液相色谱
/质谱法(LC/MS)由于能够在一次分析中检测出多种化合物,已迅速成为一般实验室的首选分析方法。然而,LC/MS 的主要局限之一是:定量的线性动态范围相对有限。
解决这一问题的新方法是使用 [+1M+H]+ 同位素质量峰进行定量,从而降低检测器的饱和度,扩大线性范围。这在全扫描应用中特别有用,例如四极杆飞行时间质谱法(QTOF),在这种方法中,同位素质量峰的获得是理所当然的。
由于常见元素(尤其是 13C)的天然同位素丰度存在差异,这种技术有可能导致额外的定量误差。
通过回顾已发表的同位素比质谱数据,我们对这种潜在误差进行了评估,发现误差可能小于 2%,不太可能超过 4%,不过这可能不适用于含有大量氮或硫原子的化合物。在使用该技术之前,必须考虑到这一额外的潜在误差,因为它可能不适合所有应用。我们认为该技术适用于我们的应用,并展示了该技术在 LC-TOF 定量方法中的适用性。
引言
液相色谱
法和质谱法的最新进展大大增加了单次分析可检测和定量的化合物数量。全扫描高分辨率
LC-MS
仪器尤其如此,至少从理论上讲,它可以将无限数量的化合物纳入筛选方法。然而,LC/MS 仪器的线性动态范围相对有限,这意味着当测量浓度超过线性上限时,样品往往需要稀释并重新分析。
这在多化合物分析方法中尤其成问题,因为在多化合物分析方法中,分析物之间的理想浓度范围可能会跨越几个数量级。在现代
液相色谱
/质谱仪中,高浓度非线性的原因通常是检测器饱和。
对于使用三重四极杆 MS/MS 针对特定化合物的方法,可以通过改变每种化合物的 MS 参数来有意降低灵敏度,或针对不同的校准范围或化合物同时使用高灵敏度和低灵敏度的离子对或检测极性,在一定程度上克服这一问题。
在获取全扫描高分辨率质谱数据的广泛筛选方法中,通常无法修改单个化合物的采集参数以降低灵敏度,从而在不影响其他分析物检测的情况下提高线性范围。为了在相关浓度下对低含量或低响应化合物保持足够的灵敏度,可能会采用提供最高灵敏度的参数,这可能会影响较高浓度下的线性范围。
Lui 等人最近提出的一项技术是:使用含量较低的同位素来增加线性动态范围。通过在 QQQ 的 Q1 和 Q3 的 MRM 离子对中加 1,或从 QTOF 的全扫描数据中选择一种替代的同位素,他们减少了到达检测器的离子数量。
这项技术在全扫描高分辨率仪器(如 QTOF)上的应用前景最为广阔,因为所有同位素数据的采集都是理所当然的,无需修改数据采集方法,也不会影响周期时间--只需在采集后更改数据处理即可。此后,分析领域的少数学者都采用了这种技术,以降低检测器的饱和度,达到定性和定量分析的目的。
这种方法在用于定量分析时的一个潜在局限性是,如果样本中的分析物与用于校准的参考标准品的来源不同(在一般实验室中通常是这种情况),它可能不包含相同比例的同位素。事实上,使用不同合成途径生产的药品可能会出现同位素差异。这种差异可能会导致计算浓度出现误差。迄今为止,文献中似乎很少考虑这种可能性。
我们利用一种含量较低的同位素,对这种差异对具有重要法医意义的药物定量可能产生的影响进行了研究。为了说明这种方法,我们简要介绍了将这种技术应用于使用 LC-QTOF 对全血中基本药物进行定量的常规方法。
样品提取处理与仪器
样本为血液样本,经蛋白沉淀,蒸发浓缩后,在乙醇中复溶。仪器为
液相色谱
-电喷雾电离质谱 (LC-ESI-MS)和 GC-C-IRMS(用于测定碳同位素比值)
结果与讨论
稳定同位素比率
一般实验室分析的大多数化合物只含有少数几种元素,即碳 (C)、氢 (H)、氮 (N)、氧 (O) 和硫 (S)。其中每种元素都有一种天然存在的同位素,带有一个额外的中子(此处称为+1A)。这些元素的丰度见表 1。在一般的分析中,化合物中较少发现的元素包括磷 (P)、氯 (Cl)、氟(F)、碘 (I)和溴 (Br),所有这些元素都没有天然存在的 +1 同位素。
表 1.天然存在的稳定同位素的丰度
元素 +1A 自然丰度 (%)
氢 2H 0.0115
碳 13C 1.07
氮 15N 0.364
氧 17O 0.038
硫 33S 0.75
一般实验室使用的典型质谱仪很容易分辨出含有额外中子的分子,但它们没有足够的分辨能力来指示额外中子在分子中所处的位置。
例如,含有一个 13C 原子的化合物无法与含有一个 2H 原子的化合物区分开来。因此,所有 +1 同位素都会被检测为一个信号,在此定义为 [+1M+H]+ 质量峰。
根据表 1 中给出的天然同位素丰度,可以很容易地确定这些同位素对任何相关化合物[+1M+H]+ 质量峰的相对贡献。
图 1 显示了一些常见药物的 [+1M+H]+ 质量峰的组成。显然,这些药物(以及大多数其他药物)的 [+1M+H]+ 质量峰的最大贡献来自 13C 同素异形体。
图 1. 同位素对[+1M+H]+ 质量峰的相对贡献。
相关话题
1
解锁高效实验室管理 全面探索LIMS系统应用
2
智能实验室管理 LIMS系统助力企业降本增效
3
自动化与智能化并进 LIMS系统推动实验室管理升级
4
实验室自动化新篇章 白码LIMS系统实现实验室管理的飞跃
5
提高管理评审实施的有效经验
+关注
私聊
珍奇异宝
第1楼
2024/09/14
应助达人
又是一份化学领域分享,希望有懂得坛友可以提出宝贵意见和指点
0
发表回复
近期热榜
【官方邀请】高效液相色谱使用情况有奖调研
【中秋佳节】 在一起月更圆!
一个“不符合”难住新领导
第三届微课大赛投票进行中ing
热门活动
第三届微课大赛投票进行中ing
【仪采通】仪器采购更轻松
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
之前看“不确定度来源及消除办法”这个说法对吗?
已应助
2023/06/25
大家食品第三方实验室过年都有哪些福利礼品?
讨论
2021/01/31
[讨论]仪器设备标识
2006/08/21
请问一下我们的营业执照是否符合要求
已应助
2023/05/25
咨询一下各位大佬,实验室里面需要几个章?就是受控、非受控、包括盖文件的等,能不能详细说一下,有照片更好,谢谢
求助
2019/07/24
如果分析员耽误了时间,你会发火吗?
讨论
2011/09/26
实验室租用实验室要注意哪些问题?
讨论
2021/10/08
攻略:如何做好实验室仪器设备的管理
原创
2016/06/17
解锁高效实验室管理 全面探索LIMS系统应用
分享
2024/09/14
智能实验室管理 LIMS系统助力企业降本增效
分享
2024/09/14
自动化与智能化并进 LIMS系统推动实验室管理升级
分享
2024/09/14
实验室自动化新篇章 白码LIMS系统实现实验室管理的飞跃
分享
2024/09/14
提高管理评审实施的有效经验
分享
2024/09/14
管理评审的意义和常见问题
分享
2024/09/14
【金秋计划】获CNAS/CMA证书后,实验室运行注意事项
分享
2024/09/13
【金秋计划】实验室为什么要保留检测余样?手写原始记录如何处理?
分享
2024/09/13
赛默飞气相TRACE1300 FPD检测器上出现结晶颗粒物是怎么原因?
求助
2024/09/10
【金秋计划】当没有合适的基质时可以用标准加入法来试试看
第十七届原创
2024/09/13
维氏硬度计的日常检查如何获得压痕参考值?
求助
2024/09/10
原子吸收火焰法测定土壤中六价铬所用质控样值一直在衰减
求助
2024/09/12
数据和结果
求助
2024/09/11
基线(随机出现)突跃有哪些原因?
求助
2024/09/12
液质有什么好项目可以做
讨论
2024/09/11
关气瓶是先关总阀还是先关减压阀?
求助
2024/09/14
环境应急监测设备有哪些
原创
2024/09/12
德国MAXOS DIN7080 250x25 mm定制热回火安全玻璃视镜
分享
2024/09/12
环境监测需要考什么证
原创
2024/09/12
如何测量环境噪声
原创
2024/09/12
扬尘噪音监测标准是多少
原创
2024/09/12
柚子富含的蛋白质
原创
2024/09/12
标准溶液、标准品(物质)
分享
2024/09/12
德国MAXOS DIN 7080-16 直径200mm*厚度30mm硬化硼硅酸盐视镜
分享
2024/09/12
品牌合作伙伴
研究月球土壤岛津助力郑大用户登Nature顶刊
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...