?质谱半定量的基本步骤?
?半定量引物的设计?：设计引物时，产物的长度最好保持在250-700 bp，以便在电泳中与引物二聚体区分开。拿到引物后，需要进行?PCR验证引物的特异性并摸索退火温度。
?提?RNA并反转录?：提取RNA并进行反转录，同时验证cDNA模板是否可用。确定内参基因的平台期?：通过PCR扩增确定产物不再增加时的循环数，即平台期。
?质量定量分析?：
使用目标离子的碎片进行定量，特征性强，排除干扰。
提高扫描速率，提高准确率和重复性。
通过色谱柱分离后定量分析，避免竞争性离子的影响。
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