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LC_MS质量定量分析注意事项及方法
zhangyongmei
2024/09/25
私聊
液质联用(LCMS)
1
、
要用目标离子的碎片定量,特征性强,排除干扰;
2
、
在定量分析的方法设置上,尽可能提高扫描速率,提高准确率和重复性(可以通过a减小扫描质量数的范围来提高目标峰的扫描次数,或将一个样品全部分析时间断分成n个segments,对目标离子单独设置扫描模式);
3
、
一定要通过色谱柱分离后定量分析,避免竞争性离子的存在影响目标离子的离子化效率;
如果目标分子未与竞争性分子完全分开,则在离子化过程中导致目标分子的离子化效率降低,导致样品分子的定量结果偏低,当然标准浓度的样品也要用相同的方法分析;
4
、
如果样品都是纯品的话可以不经过色谱柱直接进样分析,包括做标准曲线的样品(虽然不建议直接进样分析);
5
、
如果用的离子源的喷针位置是可移的话,一定要记住做标准曲线时其位置,否则其位置移动后在相同的条件下进入质谱的离子流量会发生改变,标准曲线就不能使用了!对于调用的质谱方法不要改动shealth gas and aux gas 的流速,否则会影响进入质谱的样品量;
6
、
所建立的标准曲线一个月后如果想重复使用,则用QC样品检验一下该标准曲线;
7
、
对于已经建立好的分析方法在扫描范围、流动相的组成、梯度或流速等方面不要作任何改动,否则,标准曲线要重作。
扫描范围改变目标峰的扫描次数、流动相组成改变离子化效率,流速改变色谱峰的保留时间和峰宽;
8
、
离子阱的强项在于多级-定性,四级杆的强项在于定量;
9
、
对于热稳定性不好的样品可以通过提高气速,降低毛细管温度的方法保证定量分析的重复性;一旦方法固定后不要轻易改动。
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