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用荧光分光光度法测定硒的含量的操作要点
小电子PCB
2024/10/06
小电子
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原创大赛公告
如何用荧光分光光度法测定硒的含量。
这是一种非常实用的方法,广泛应用于环境监测和食品分析等领域。
首先,样品的前处理非常重要。我们需要用混合酸(比如硫酸和过氧化氢)来消化样品,把硒转化为四价无机硒(Se4+)。这一步要特别注意安全,要在通风橱中进行,避免酸雾伤人。消化过程中,要控制好温度和时间,避免硒的损失或杂质的产生。
接下来,我们要用到一种神奇的物质——2,3-二氨基萘(丹)。在酸性条件下,Se4+与丹反应生成一种荧光物质——4,5-苯并苤硒脑。这个反应要在暗室中进行,因为丹见光易分解,影响实验结果。加入丹后,需要在水浴中加热一段时间,让反应充分进行。
然后,我们用环己烷来萃取生成的荧光物质。萃取过程中,要剧烈振摇,让水相和有机相充分接触,提高萃取效率。萃取完成后,静置分层,弃去水相,保留环己烷相。
最后,我们用荧光分光光度计来测定环己烷相的荧光强度。通过与硒的标准曲线比较,就可以计算出样品中硒的含量。在测定荧光强度时,要设置好激发光波长和发射光波长,通常激发光波长为376nm,发射光波长为520nm。
需要注意的是,整个实验过程中要严格控制实验条件,比如溶液的pH值、反应时间、温度等,这些因素都会影响实验结果。此外,实验中使用的试剂和器皿要保证干净无污染,避免引入杂质。
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