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液相色谱(LC)
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双峰或肩峰原因——柱子
p3203140
2024/10/09
私聊
液相色谱(LC)
这里的双峰是指:本身为单一化合物,出现了双峰或肩峰,如下图
1、
原因—
柱子
色谱柱用久了:
①样品中的不溶物质累计在了柱头,导致填料脏了(黑乎乎或黏黏的东西)
②筛板有微小的颗粒堵塞形成的“涡流”(如下图
b
)
③
柱头填料被溶解,有了空腔,存在死体积(如下图
c
)
④
也有可能是稀释剂的原因,但不在本处讨论。
1、
解决办法
对于①,在色谱柱浸润的情况下,用锋利的薄刀片,轻轻的把脏东西平整削掉一层,不要“挖”,这会形成“凹”状,产生死体积,峰型会更糟糕,如果填料是干燥的,存在把柱头填料成“块”带走的风险,故湿润条件下操作最佳,对化合物的峰型有一定的改善,但不能
100%
的恢复到原状。
对于②,把对应的筛板拆下超声清洗,装回去即可,一般都能恢复到原状。各个公司的筛板各不相同,有的筛板可以单独取出来(如下图
B
中的色谱柱),这种比较好清洗,也容易解决问题,也有的筛板和柱头卡的很紧,只能和螺帽一起拆下来清洗(如下图
A
),因为进口端口径很小,脏东西不容易清洗去除,效果有限,且这种柱头拆下来,装不好会漏液,不建议力量较小的女生拆。也可以低流速进行反冲。
对于
③
,找相同的填料补回去,没有专用的工具,根本不现实,报销了吧,如果实验室比较节省,没柱子用,反着用效果也是杠杆的,说不定还能用一年半载也是可能的。
如果家里有矿,确定是以上原因,直接买新的色谱柱就行;
新手,尽量不要私自去拆,征得上面同意后在拆,拆了没解决问题,还引发新的问题,专业背锅侠就扣上了。
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私聊
Willdo
第1楼
2024/10/09
应助达人
该换就换,尽量不去折腾。
0
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