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色谱柱报废/更换的判断指标
p3203140
2024/10/23
私聊
液相色谱(LC)
判断色谱柱需要报废或者更换的时机,主要依据以下几个关键指标:
1. 柱压变化:当色谱柱(5um,4.6*250mm)使用过程中柱前压显著增加,特别是超过2900psi(20Mpa),并且在更换了进样器与色谱柱间的在线滤过滤器后压力依旧高,这通常表明色谱柱可能因污染或损坏导致压力升高。据统计,超过60%的色谱柱损坏与压力过高有关。
2. 分辨率降低:分辨率是评价色谱柱性能的关键指标。如果相邻峰的分离度下降到影响分离效果,尤其是当R低于1.5,对于对称峰而言,可能需要考虑更换。如果峰拖尾严重,需要更高的分辨率来确保基线分离,这也可能是更换色谱柱的信号。
3. 峰形改变:峰形变宽、拖尾或前延,尤其是当这些变化影响到峰的识别和定量准确性时,表明色谱柱的填料可能已经受损或污染。
4. 塔板数减少:虽然塔板数不是唯一的判断标准,但大幅度下降(比如低于新柱子的50%)可能指示色谱柱性能衰退。需要注意的是,塔板数对分辨率的影响是平方根关系,因此即使塔板数减半,分辨率的下降也是有限的。
5. 保留时间的改变:如果样品的保留时间有显著变化,且排除了其他系统因素(如流动相组成、柱温等),这可能意味着色谱柱固定相的改变,需要考虑更换。
6. 基线噪音增加:基线不稳定或噪音显著增大,如果不是氘灯能量不足,则可能是色谱柱污染的一个标志。
综上所述,更换色谱柱的决定应基于综合考量,包括柱压、峰形、分辨率、塔板数、保留时间和基线噪音等多方面因素。在实际操作中,结合具体实验要求和色谱柱的使用历史,定期评估色谱柱的性能,以确保实验数据的准确性和可靠性。
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