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肽的液相色谱不出峰是什么原因

液相色谱(LC)

  • 用甲醇溶解了,初始浓度是出峰的,但是稀释后第二个浓度就不出峰了,稀释第一次用的甲醇,说是挂不上柱子,用的纯水第一次出了,这次跑又没了,不知道什么原因?是合成的肽。
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  • JOE HUI

    第1楼2024/11/01

    应助达人

    在液相色谱分析中,肽不出峰的原因可能较为复杂。以下是一些可能的原因和建议:

    1.样品问题:肽的稳定性可能较差,在稀释或实验过程中发生了降解或变化。确保肽溶液的储存条件合适,尽量避免反复冻融。

    2.稀释剂问题:虽然纯水第一次能出峰,但后续又不出峰,可能与水的纯度、离子强度或其他因素有关。可以尝试使用其他适合的缓冲液进行稀释,以维持溶液的稳定性和色谱行为的一致性。

    3.柱子问题:柱子可能存在污染、过载或损坏等情况。柱子污染可能导致肽的吸附或结合能力下降。考虑对柱子进行清洗和维护,或者更换新的柱子。

    4.流动相问题:流动相的组成、pH 值、流速等条件可能需要优化。不合适的流动相条件可能影响肽的分离和出峰。

    5.仪器问题:检查液相色谱仪的各个部件是否正常工作,例如泵的压力是否稳定、检测器是否灵敏等。

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  • 123

    第2楼2024/11/01

    应助达人

    调整样品的溶解条件、优化色谱柱和流动相的选择,以及检查色谱系统的操作设置

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  • ztyzb

    第3楼2024/11/01

    应助达人

    楼主,建议您把仪器配置和条件发一下,初始浓度出峰但稀释后不出峰有可能是浓度太低了,考虑增大浓度或者提高进样量试试,另外考虑以下原因:

    1、色谱柱配置不合适;2、流动相问题;3、接头、泵或者检测器等漏液。

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  • zhangyongmei

    第4楼2024/11/01

    会不会是样品不稳定呀!我之前做苯肼的时候就是一阵走出来,然后再走一两针就没有了。后面发现是在溶剂里面不稳定,换了很多溶剂,后面找到了一个相对比较稳定的

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  • Ins_0880d64f

    第5楼2024/11/01

    检查操作步骤,再试一次

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