【求助】进生物样品的柱子压力高,反冲也解决不了,怎么办?

换新的用吧，估计不能用了。

也许可以用DMSO试验一下。
流动相1，水，2－甲醇，3－CHCl3
步骤：
先用水做流动相，走10倍柱体积，每5分钟进200ul的DMSO－水（1：1）溶液
然后水做流动相，走10倍柱体积
再甲醇走10倍柱体积
CHCL3走10倍柱体积
甲醇走10倍柱体积
水走10倍柱体积

柱子堵了,一般反冲作用不大,有可能是柱头的筛板堵了,把柱头打开,清洗筛板看行不行.如果不行,换筛板.

供参考：
【分享】[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相网上培训课件……色谱柱清洗与再生[/url]

这是堵柱子了，我们以前遇到过这种情况，一般来说，冲柱的作用不大，反冲尽量不要采用。比较好的是修补柱头，将柱头的筛板取下，以甲醇超生清洗30 min，将柱头脏的部分轻轻的刮掉一薄层，要尽可能的薄，以同等的填料湿法修补柱头，一定要压紧压实，然后重新将柱子组装好，测试看看柱效，如果柱效没问题，压强降低，进样分析峰不分叉，则可以继续使用，反之则应该更换新柱。
作生物样品，很容易发生堵柱问题，所以在进行液相色谱分析前，一定要选择合适的样品前处理方法，尽可能的将容易堵柱的物质处理尽，不要带到液相色谱中。

你的样品过滤了吗？没有过滤的话可能是柱子堵了；过柱了的话，还可以考虑冲洗，可以从水相过渡到纯有机相，连续数小时，不建议使用纯的异丙醇，以丙醇的比例最好不要超过20%，水相时加入5%的盐酸，水+乙腈到乙腈，再到乙腈+异丙醇