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第9楼2009/07/16
蔗糖霉(转化霉)的测定有化学法和物理法。下面主要介绍一下化学方法,化学法是用比色法或滴定法测定蔗糖水解时生成的还原己糖的量。
试验步骤:
1.称取10g过1mm筛的风干土样,置于100mL容量瓶中,加1.5mL甲苯(泥炭沼泽土壤用甲苯5mL),在室温下放置15min。
2.注入基质(20%蔗糖溶液)和磷酸盐缓冲溶液(pH5.5)各10mL。
3.培养23h后,用38摄氏度的水将瓶中混合物稀释至刻度(甲苯应浮在刻度以上),充分混合后重新置于恒温箱中。
4.再培养1h后,取20mL未过滤的透明液,测定其还原糖。
5.每组测定时,需设置无糖溶液和蔗糖溶液为对照。
6.还原糖测定步骤如下:
a.往100mL三角瓶中注入10mL菲林溶液和20mL供试溶液(泥炭沼泽土和熟化良好的土壤用甲苯5mL),并以20mL蒸馏水。
b.将以上三角瓶在沸水水浴中放置10min。
c.由水浴中取出三角瓶,于自来水流下冷至25摄氏度,再往瓶中注入3mL33%碘化钾溶液和4mL稀硫酸(1:3)。
d.用0.1mL硫代硫酸钠滴定以上混和液,应先注入0.5mL淀粉指示剂,再进行滴定至蓝色消失。
e.土壤的转化霉活性,以单位土重的0.1mol/L硫代硫酸钠毫升数(对照与试验测定之差)表示。