【求助】各位大虾：救救我这位液相的小虾米吧！

[quote]原文由 ab2001 发表:本人才开始接触液相，周围也没懂的人，简直一头雾水呀！请问大侠们：
1、作液相的所有条件都是用标准品来确定的吗？如果用标准品确定好了条件，但上样之后发现出的峰不好，是要改变所确定的条件呢，还是改变前处理方法？
采用标准品来摸索色谱条件显然非常浪费，有些标准品量少，又非常昂贵，用一般纯样品制样摸索即可。
峰形不好一般是洗脱剂的配比不佳，或者柱子过载导致，与样品前处理关系不大，当然，合适的样品前处理方法对获得准确的定量结果，保护柱子，改善峰型也是重要的，因此，在样品前处理方法固定之后（最大限度保留样品，去除杂质，特别是高分子杂质和微粒），在摸索和改变色谱条件是必要的。

2、用HPLC-FLD方法时，激发波长和发射波长只能从文献中获得吗？有没有什麽方法例如像UV那样通过扫描就可知道最佳检测波长？
如果是成熟的样品，当然查阅文献找激发波长和荧光检测波长是最好的，最省事的方法，但是在科研中，也会遇到文献中没有发表相关参数的产品（化合物），这个时候，使用荧光扫描分光光度计对样品进行扫描以判断最佳激发波长和检测波长是合适的，也就是说，要对样品化合物的荧光光谱特征进行一些研究才能设定最佳检测条件。
一般HPLC的荧光检测器并不具有激发光波长选择功能，他们大多数是使用氙灯做为激发光源，激发光是一个谱带，这样最大限度地保证了灵敏度。只需要选择检测波长即可。