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【求助】这种现象正常吗？

前处理综合讨论

  • 我用葡聚糖凝胶过滤后，柱子上前后两个色带很明显，中间还有空白色带，可是收集的前面的大分子的色带上毛细管电泳，还是有小分子的色带，这现象正常吗？我是新手，请各位指教！
    另外，前面收集的牛血清白蛋白的溶液怎么测它的浓度？文献很多说是用紫外测其吸收，可是我不知道牛血清白蛋白的摩尔吸光系数啊？谁知道啊？在280nm处的。
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  • tianru的爸爸

    第1楼2007/07/19

    你的现象是正常的，因为葡聚糖凝胶柱子的柱效过低造成的。

    正常你的毛细管电泳中小分子含量应该很低了。

    测前面的牛血清白蛋白浓度，可以用普通的蛋白浓度测定方法：紫外吸收法、凯氏定氮法、Lowry法、考马斯亮蓝染色法，，，

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  • cherry39

    第2楼2007/07/19

    非常感谢lxdongzi2003！也正如你所说的，电泳上小分子的电泳峰减少许多，我以为可以全部除掉呢。
    我正在用紫外测它的浓度。

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  • biotrandglobal

    第3楼2007/07/19

    蛋白质用紫外吸收法测定浓度的公式很多：
    如直接用紫外吸收值与摩尔消光系数相乘，但要求纯度很高才行；
    又如用1.45A280nm-0.74A260nm计算蛋白质的浓度。

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