【求助】玉米中植酸的测定方法

【GB/T 17406—1998】

食品中植酸的测定 　

前　　言

　　本标准系在参考国内外有关资料的基础上，吸取离子色谱-柱后反应-分光光度法与离子交换-消化比色法的优点，经系统研究制定出来的。本法灵敏、精确、快速、操作简单，适用于一般实验室常规检验。
　　本标准由中华人民共和国卫生部提出。
　　本标准由中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所负责起草；中国食品发酵工业研究所参加起草。
　　本标准主要起草人：刘胜杰、曲宁、元晓梅、蒋明蔚。
　　本标准由卫生部委托卫生部食品卫生监督检验所负责解释。
　　1　范围
　　本标准规定了用离子交换分离，分光光度法测定食品中的植酸含量。
　　本标准适用于谷类、豆类、坚果及块茎类食品。
　　2　原理
　　用阴离子交换树脂将植酸和植酸盐吸附，使之与无机磷及其盐类等杂质分离，用氯化钠溶液洗脱，洗脱液中的植酸与三氯化铁－磺基水杨酸混合液作用，产生褪色反应，植酸含量与褪色程度成正比，用分光光度计在波长500nm处测定吸光度，计算样品植酸含量。
　　3　试剂
　　本方法所用试剂纯度均为分析纯，实验用水为蒸馏水，以下简称为水。
　　3.1　30g/L氢氧化钠溶液。
　　3.2　0.7mol/L氯化钠洗脱溶液。
　　3.3　0.05mol/L氯化钠洗涤溶液。
　　3.4　100g/L硫酸钠－盐酸提取溶液：称取50g无水硫酸钠溶于1.2%盐酸溶液，并定容至500mL。
　　3.5　三氯化铁－磺基水杨酸反应溶液：称取1.5g三氯化铁和15g磺基水杨酸，加水溶解并定容至500mL。使用前以水稀释10倍。
　　3.6　植酸标准溶液：
　　称取1.7347g植酸钠标准品(纯度98%)，精确至0.0001g。加水溶解并定容至100mL。使用前，吸取5mL用水定容至500mL，其浓度为0.1mg/mL。
　　3.7　阴离子交换树脂：AG1－X4(100～200目)。
　　4　仪器与设备
　　4.1　分光光度计。
　　4.2　离子交换柱：φ0.8cm×10cm。
　　5　试液的制备
　　5.1　提取：称取经干燥粉碎的均质样品0.5～2.0g(约含植酸8mg)，精确至0.01g，置于具塞三角瓶中，加入50mL硫酸钠－盐酸溶液(3.4)50mL，振荡提取2h，过滤，收集滤液备用。
　　5.2　分离：将0.5g阴离子树脂(3.7)湿法填装于交换柱(4.2)中，用氯化钠溶液(3.2)洗脱交换柱，再用水洗涤交换柱至无氯离子。取5～10mL样品提取液(5.1)，加1mL氢氧化钠溶液(3.1)，补加水至总体积30mL，混匀后倒入离子交换柱中。然后分别用15mL水和氯化钠洗涤溶液(3.3)，以1mL/min的流速洗涤交换柱，弃去洗涤液。最后用氯化钠洗脱溶液(3.2)洗脱交换柱，收集于25mL刻度具塞试管中，并定容至刻度。
　　6　分析步骤
　　6.1　工作曲线的制作：精确吸取植酸标准溶液(3.6)0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL于六只10mL比色管中，用水补足至5mL，加入反应溶液(3.5)4mL，摇匀，以3000r/min转速离心10min。放置10～20min后，将上层液倒入1cm比色皿中，于500nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，植酸含量为横坐标，绘制工作曲线(见图1)或计算回归方程。
　　（图略）
　　6.2　试液测定：取洗脱液(5.2)5mL，(约含植酸0.3mg)于10mL比色管中，加入反应溶液(3.5)4mL，摇匀，其余步骤同6.1条，测其吸光度值，并在工作曲线上查得或从回归方程计算出试液中植酸含量。
　　7　结果
　　7.1　样品中植酸含量按式(1)计算：
　　
　　式中：X——样品中植酸含量，mg/g；
　　c——样液含植酸量，mg；
　　m——样品的质量，g；
　　V1——提取液定容后的体积，mL；
　　V2——分离后，取提取液的体积，mL；
　　V3——分离液定容后的体积，mL；
　　V4——试液测定时，取分离液的体积，mL。
　　8　允许差
　　同一实验室，同一样品的两次测定结果的相对偏差小于5%。本方法最低检出限为8.27μg/mL