yinbing
第8楼2008/03/15
TO:molingli
一般都不需要预饱和薄层板,而是预饱和层析缸,使流动相充满整个展开空间。
预饱和薄层板和不预饱和,会影响Rf值,哪个分离效果好,要靠摸索。
不预饱和层析缸,直接放进薄层板,空间的蒸汽相未达平衡,越往上面,蒸汽相浓度越稀,薄板上下位置与蒸汽相间的平衡交换是不同的,再有就是展开剂在薄板上爬行时会形成流动相分层的现象,二者势必影响影响流动相的组成,形成一个剃度。其实TLC过程本身就是个极其复杂的过程。
预饱和薄层板爬行速度应该比不预饱和薄层板快些,二者相差不会太大,其实我们在意的是分离效果!
你觉得薄板一放进去,一两分钟就能达饱和了吗?
molingli
第9楼2008/03/16
谢谢yinbing的回复,我觉得如此说的梯度问题仅仅是想象及理论的推断而以,实际上到底是什么样的一个情况我也搞不很清楚,所有的薄层分析都是一个差速的迁移,理论上说这种迁移受多方面的影响,也正是你所说的是一个复杂的过程。
确实是我们做TLC在乎的是其分离效果,做鉴别的多点,但是也有一些情况下是做薄层扫描的话,是不是一定就得饱和呢??这当然是多做几次就知道结果了,可是谁能告诉我这预饱和半个小时的来由??
曾有经验就是你说的饱和跟不饱和的差别不是很大,我也曾考查了一下将展开剂倒入展开缸后大约五分钟左右将盖子揭开味道都已经很大了,所以我觉得这个饱和的说法,我的意见是,有时间饱和的话尽可能饱和,如果没有时间饱和的话,至少在你点板之前就应该把展开剂倒入缸内,在点板的同时也是一个饱和的过程,而且我觉得最重要的一点是,在把点好的板放入缸内时,一开始速度很快,但其速度应该比蒸汽慢得多,所以我至今仍有疑惑的就是您所说的“直接放进薄层板,空间的蒸汽相未达平衡,越往上面,蒸汽相浓度越稀,薄板上下位置与蒸汽相间的平衡交换是不同的,再有就是展开剂在薄板上爬行时会形成流动相分层的现象,二者势必影响影响流动相的组成,形成一个梯度。”
也许这有点抠死理,但是我现在还是没有搞明白,我现在的做法仍然是事先预饱和的方法,有时也会做一下平行比较,确实没多大的差别,如果谁有这样的经验而且是做过扫描的话,望不吝赐教。谢谢……