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xiaoxiaomo
第4楼2007/09/04
回复2、3楼:我们一开始就是用甲醇和水来作的,试了各种比例都不能得到一个良好的峰,拖尾很严重,光滑度也不好,响应也不高,也试用过甲醇:乙腈,乙腈:水,也不可以,最后用甲醇:乙腈:水,也不大好。最后经提示用了醋酸铵,开始得到了较高的响应和良好的峰形。(注意:上述各个流动相都在水相加了0.1%的甲酸)。后来加了醋酸铵后,发现提高甲酸的响应,可以得到更高的响应和峰形,因此加到了整个体系的4%。我们的监测模式是MRM。
怎么办啊?
xiaoxiaomo
第5楼2007/09/04
回复三楼:整个体系的ph是2点几。监测模式是MRM.柱子曾因流动相长菌而发生过赌塞,依利特的5cm短柱,柱压飙到了4000多。也可能是流动相体系太酸,长期积累造成的。现在反用柱子,柱压不高,800多。唉!三乙胺刚刚试用,看样子不知道还能不能用下去了。麻烦高手再继续指点指点啊!!!
tanggangfeng
第7楼2007/09/04
如果你要看syuiq-5含量,流动相加酸或醋酸铵都可以,浓度一般在0.1% ,正离子模式,酸性太强易使柱子坏掉。
如果要检测is含量,建议用醋酸铵0.1%负离子模式。
还有问下你的质谱是单四极杆,还是QQQ,还是离子阱。
单单四极杆定量是很差的 。很少用来定量 。
你的化合物有紫外吸收,没啥不用紫外来定量哪?
dingcungang
第10楼2007/09/05
楼主遇到的问题有三个互相牵制的面 1 质谱响应的灵敏度 2 质谱响应的重复性 3色谱峰形。
毫无疑问甲酸和醋酸胺能提高质谱响应的灵敏度,但是多少量绝对是一个问题。我的经验是在万分之一(0.01%)的水平以上很多化合物的质谱响应随着酸的加入量而降低,而且酸的加入量太大有时会带来质谱响应变异增大的问题,缓冲盐有相似的问题。
甲酸和醋酸胺对色谱峰形的影响楼主没有说清楚,到底是那个起了决定性作用?楼主是试图在酸的条件下实现带有碱性氮原子的化合物的色谱分离,也许可以换一个思路。在你的流动相中加入改善峰形的化合物(我认为这里是醋酸胺,甚至考虑加入氨水,极低浓度,可能在万分之一以下)获得良好的峰形,然后在柱后加入提高质谱响应添加剂(这里可能是甲酸),这一切只要一个三通阀就可以做到的。 顺便说一句有些化合物色谱分离有特殊性,有的需要性能优良或特殊的柱子,有的是需要大大提高柱温的。