【求助】关于衍生化试剂的几个问题

你查一下资料，我觉得衍生条件不对，没有反应完全，或者衍生试剂不对，衍生物不稳定。更换衍生化试剂。

应该是没有衍生成功，建议将实验条件发上来让大家看看，帮你查原因。

你还是把你的具体分析条件写上来吧！如果不是谁也帮不了你，太多因素在内面了，而且你可能一直是用等度洗柱的，你的分离方法和流动相应该有点问题！

具体条件如下：
流动相：以醋酸盐缓冲液（取醋酸钠6.8g，加水700ml使溶解，用醋酸调节pH值至5.9，加水至1000ml）-甲醇（95：5）为流动相；检测波长为340nm。
测定法：精密量取0.1mol/L硼酸盐缓冲液（pH值9.5）400ul，置适宜容器中，精密加入供试品溶液100ul（0.5mg/mL）和衍生化试剂（取邻苯二醛100mg，加无水甲醇2.5ml，加3-巯基丙酸0.1ml和0.1mol/L硼酸盐缓冲液22.4ml，摇匀。黑暗处放置30分钟后使用。)100ul混合，衍生化反应进行1分钟，精密量取20ul注入液相色谱仪，记录色谱图
多谢大家指教

看了你说的问题,我认为问题很简单,主要是由于你的流动相条件没有选择好,衍生化试剂和分析物的衍生化产物峰重合.
解决办法:改变流动相的有机相比例,调节pH,调节离子强度来将二者分开.这样,3个问题都可以解决.

请教一下：如果衍生化试剂和分析物的衍生化产物峰分开的话，那跑出的图谱上就会有两个峰，分别为衍生化试剂和分析物的衍生化产物的峰，是这样吗？

请教一下：如果衍生化试剂和分析物的衍生化产物峰分开的话，那跑出的图谱上就会有两个峰，分别为衍生化试剂和分析物的衍生化产物的峰，是这样吗？

应该是这样
除了 是由于你的流动相条件没有选择好,衍生化试剂和分析物的衍生化产物峰重合 这个原因外，还有可能是你的衍生条件有问题 没有被完全衍生化

在衍生化反应中，并非所有的衍生化试剂都要反应掉，通常我们加入的衍生化试剂的量要过量， 有时甚至加入的量很大，而真正参加反应的则很少，只要衍生化产物的出峰时间不与其他的峰重合就可以，我认为你的两个谱图中前面的小峰的面积和高度相差不大，可能是于有你加入的衍生化试剂远远过量引起的，你可以减少衍生化试剂的量，看看目标化合物的峰面积是否改变。
第2和3点问题，不知道你是否作了稳定性实验，这有可能是稳定性的问题。

建议你改变衍生化试剂与反应物的配比，反应温度，反应时间等条件，寻找最佳的衍生化条件，找到最佳反应条件后，在对反应物和衍生化以后的目标化合物做一下稳定实验，看看它们的稳定时间，只有在稳定时间内的实验数据才是可靠的