兔膀胱平滑肌细胞

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

兔膀胱平滑肌细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的兔膀胱平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的兔膀胱平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

兔膀胱平滑肌细胞分离自膀胱组织；膀胱是主要由平滑肌细胞组成的中空器官，膀胱平滑肌的舒张和收缩使得膀胱分别储存和排出尿液。膀胱平滑肌细胞表型的调控和可诱导一氧化氮合酶的表达与多种病理状况有关，包括膀胱功能障碍。研究表明，组织缺氧抑制膀胱平滑肌细胞的增殖，膀胱平滑肌细胞的分化依赖于膀胱上皮细胞释放的因子。膀胱平滑肌细胞外基质的分泌表型可通过细胞所经历的机械变形频率而改变。平滑肌是许多疾病中的共同路径，因此，了解在疾病发生及持续过程中平滑肌怎样变化，这是治疗方法取得进展的重要一步。膀胱壁由三层组织组成，由内而外为黏膜层、肌层和外膜。其中，肌层主要由平滑肌构成。膀胱平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。体外培养膀胱平滑肌细胞不仅为组织工程膀胱、尿道提供种植细胞的必要手段，也是研究平滑肌瘤的基础与前提。

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

公司正在出售的产品：

H-Thr-Arg-OH  13448-26-5  C10H21N5O4

H-Thr-Asn-Arg-Asn-Phe-Leu-Arg-Phe-NH₂  113611-68-0  C48H75N17O11

H-Thr-Asp-OH  108320-97-4  C8H14N2O6

H-Thr-Gln-OH  96337-79-0  C9H17N3O5

H-Thr-Glu-OH  54532-73-9  C9H16N2O6

H-Thr(tBu)-allyl ester . HCl  218938-63-7  C11H21NO3 · HCl

H-Thr(tBu)-OtBu  5854-78-4  C12H25NO3

H-Thr(tBu)-pNA  201807-08-1  C14H21N3O4

H-Thr-Ala-OH  56217-50-6  C7H14N2O4

H-Thr-AMC  191723-66-7  C14H16N2O4

H-tBu-DL-Gly-OH  33105-81-6  C6H13NO2

H-tBu-Gly-OtBu . HCl  31556-74-8  C10H21NO2 · HCl

H-Thr(Ac)-OH . HCl  519156-32-2  C6H11NO4 · HCl

H-Thr(Bzl)-OH . HCl  60856-51-1  C11H15NO3 · HCl

H-Thr(PO₃H₂)-OH  1114-81-4  C4H10NO6P

小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Rat protein kinase B (PKB) ELISA Kit 大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA试剂盒

Humanadenylylcyclase1,AC-1ELISAKit 人腺苷酸环化酶1(AC-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor17-OHCSELISAKit大鼠17羟皮质类固醇规格：48T/96T

饮料精氨酸(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒20次

MouseLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

兔膀胱平滑肌细胞小鼠T细胞白血病同源盒蛋白1(Tlx1/Hox11/Tlx-1)ELISA试剂盒 ，英文名： Tlx1/Hox11/Tlx-1 ELISA Kit

大鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA检测试剂盒Ratplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit 96T/48T

人HLAⅡ类组织相容性抗原，DPα1链(HLA-DPA1)ELSIA 试剂盒 Human HLA-DPA1 ELSIA kit

英文名称MouseThyroglobulinELISAKit小鼠甲状腺球蛋白(TG)规格：96T/48T

冰冻切片胆色素格美林(Gmelin)染色试剂盒50次

Ratacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISA试剂盒大鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human ai zona pellucida aibody (aZP) ELISA Kit 人抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒

Humanγ-glamylsysteinesyhetase,γ-ECSELISAKit 人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforACA-IgM(Mouseai-cardiolipinaibodyIgM)ELISAKit小鼠抗心0脂抗体IgM规格：48T/96T

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Mouseoxytocin,OTELISAKit小鼠催产素(OT)ELISA试剂盒规格：96T/48T