推荐厂家
暂无
暂无
2013年04月23日 来源: 北京日报 由北京义翘神州生物技术有限公司研制的H7N9疫苗的关键蛋白——血凝素蛋白和神经氨酸酶蛋白已获得成功并规模化生产。记者昨日从北京经济技术开发区了解到,虽然并不意味着真正意义上的禽流感疫苗已经成形,但这些关键蛋白为科研人员进一步研制成功H7N9疫苗以及药物奠定了关键性的基础。目前,蛋白已经被送往国内外几十家科研院所和研究机构,为下一步研制疫苗做准备。 疫苗研制时间省下数月 在位于北京经济技术开发区的义翘神州实验室的一角,一股淡红色的液体缓缓流过白色的纯化柱,经过一系列纯化技术后,淡红色液体变成了无色透明的液体。这股无色液体,就是H7N9疫苗的关键蛋白。 “如果把H7N9比作一个骑车持刀抢劫的歹徒,那么H和N就分别是凶徒的两把利刃,H是指血凝素蛋白,N指的是神经氨酸酶蛋白,前者负责‘刺伤’细胞,后者负责‘开车’,让病毒感染伤害更多的细胞。”义翘神州技术人员张杰告诉记者,血凝素蛋白主要的功能是感染人体内的细胞,神经氨酸酶蛋白的作用则是使已感染的细胞进一步感染其他的细胞,扩散病毒的影响。 “知己知彼方能百战不殆。”要想研发出抑制这两种蛋白作用的抗体和疫苗,关键的一步,就是要根据流感病毒的基因序列研制出相应的重组蛋白。如果没有重组蛋白,科研机构需要利用技术手段研制假病毒,或者利用病毒毒株本身才能进行疫苗研究。 “毒株本身是有毒性的,出于安全考虑,除了疾控中心极少有机构能够获取毒株。而假病毒获取的技术手段有很高的挑战性。”张杰介绍,一个流感爆发后,缺乏蛋白研制经验的科研机构如果要想研制出流感病毒的这两种关键蛋白,快则数月,慢则需要半年甚至更长的时间。 “在安徽流感病人体内提取的毒株,和上海流感病人体内提取出的毒株,虽然基因序列相似,但仍有区别。成功的疫苗和治疗性药物必须对这些不同种类的毒株都有效才行。”张杰介绍,为了给疫苗、药物进一步研发提供更有针对性的蛋白,义翘神州研发的H7N9关键蛋白,已有“安徽株”和“上海株”两种。 关键蛋白研发12天搞定 3月底,全国首例人感染H7N9病例出现之后,中国疾病预防控制中心及时从病例样本中分离到H7N9禽流感病毒,并完成了鉴定和全基因序列分析。4月5日,义翘神州获得了公开的H7N9病毒的基因序列信息,包括公司总裁谢良志在内的30多位科研人员取消了周末,投入了一场与时间赛跑的研发战役。 要想快,不能乱。基因合成和目标载体构建、细胞培养、蛋白质纯化、质量控制和鉴定,这是研制蛋白过程中最关键的几个步骤。这些普通人在大学实验室里才能听到的专业术语和研发步骤,在义翘神州却变成了一场紧张有序的“流水线”式研发。 在分子生物学实验室里,技术人员在根据H7N9基因序列获取病毒基因、构建目标载体的同时,下一道工序的细胞培养实验室里,技术人员已经将细胞培养所需的培养液、器皿准备妥当。几天后细胞培养结束,提纯工序早已“整装待发”。30多位研发人员在上下游阶段有妥善的分工,在各个研发工序的衔接上不敢浪费一点时间。 “相比所有科研人员埋头苦干自己那份科研任务的单纯实验室式的科研,我们的科研流程已经进入了更为有条不紊的流水线式研发阶段,所以才有了12天研制出蛋白的速度。”张杰说,这成为了全球成功研发H7N9流感疫苗关键蛋白并具备量产能力的首个案例。 相关新闻 H7N9患者转诊可提高报销比例 本报讯(记者 袁京)针对我国部分地区出现人感染H7N9禽流感疫情,人力资源和社会保障部昨天发布通知,要求各地保证参保患者及时救治,减轻经济负担。对于因治疗需要转诊至高级别医院的患者,可适当提高报销比例。如果治疗期间使用了非医保药品或医疗项目,各地可根据需要适当放宽报销条件。 人保部提出,各地医保管理部门可根据实际情况和救治需要,在入院标准、定点医院选择等方面适当放宽条件,保证参保患者及时救治。对于因治疗需要,经基层医疗机构转诊至高级别医院的患者,可执行基层医疗机构支付比例或按地方规定适当提高支付比例。对参保患者治疗期间确需使用的不属于基本医保支付范围的药品和医疗服务项目,各地可参考国家卫生计生委制定的《人感染H7N9禽流感诊疗方案》,根据急救、抢救需要,予以放宽,以减轻参保患者治疗费用负担。各地临时放宽纳入基金支付范围的药品和诊疗项目要及时上报,由各省级人保部门汇总报送人保部医疗保险司。 对参保患者在参保地发生的符合规定的医疗费用,各级医保经办机构要实行即时结算;对于因转外就医等原因不能即时结算的,要简化结算手续、缩短结算周期,减轻参保人员垫支负担。对个人负担较重的参保患者,要做好医疗保险与医疗救助、大病医疗保险的衔接工作,具体办法由统筹地区制定。 人保部还提出,各省市要加强信息调度,随时了解掌握本地区人感染H7N9禽流感发病和医保基金支付情况,做好预案,并及时报送疫情及保障信息等。
当你看见婴儿柔滑细腻的肌肤,你是否除了羡慕外还从心底发出一声感叹?感叹岁月的流逝,使你的肌肤水嫩不再!感叹镜中自己的脸已被浅浅的细纹爬满!你可知道,这都是胶原蛋白缺失惹的祸! 知道吗,胶原蛋白在滋润着你的皮肤,增加着皮肤弹性的同时,还增加着你头发、指甲的光泽,改善着你的关节和骨骼的健康,这个干燥风大的春天,如果你的皮肤感到了不适,也许应该在胶原蛋白上做点文章了。 胶原蛋白Q&A 每次在外边吃饭时,都会有人指着那盘猪蹄殷勤地对同桌的女士说:“女孩子多吃点好,能美容。”相信不少女性都听到过类似的话。为什么猪蹄能美容?原来是猪蹄里含有一种叫胶原蛋白的物质,这种物质可以增强肌肤的弹性,延缓肌肤的衰老。可什么是胶原蛋白,它真像人们说的那样,吃了它,就能让皮肤水嫩光滑、结实有弹性吗? 带着问题,我们咨询了美容营养专家段建华。 Q:胶原蛋白在人体有什么用? A:胶原蛋白存在于人体皮肤、骨骼、牙齿、肌腱等部位,主要生理机能是做结缔组织的粘合物质。胶原蛋白能撑起皮肤。在皮肤方面,它与弹力纤维合力构成网状支撑体,提供给真皮层安定有力的支撑。 Q:为什么随年龄的增长皮肤会呈现出老态? A:随年龄增长,人体胶原蛋白含量会逐渐流失,网状支撑体亦会变厚变硬、失去弹性,当真皮层的弹性与保水度降低,表皮即形成松垮的皱纹。 Q:维持胶原蛋白含量,真能保持年轻? A:对,虽然胶原蛋白仅占总人体3-5%,但它是一个人身体外观是否呈现老态、肌肤样态是否有弹性的关键性因素,一旦身体获得足够胶原蛋白,即能迅速修复受伤的组织,提升细胞新陈代谢。因此只要护住这个关键,想保持年轻就简单多了。
[size=14px] [/size] [size=14px]青蒿素(Arteminsinin)是从植物青蒿中分离出来的倍半萜内酯,与它的一些衍生物一起被公认为一种有效的用于治疗疟疾药物,现已逐渐被认为是潜在的抗肿瘤药物,已有一些研究试图确定青蒿素的蛋白质靶点并破译青蒿素杀死癌细胞的分子机制,但迄今为止,青蒿素的确切抗肿瘤相关靶点仍有很大挖掘空间。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]1、细胞毒性筛查将ART1确定为潜在的抗肿瘤药物[/size] [size=14px]作者首先制备了C-10位的不同芳基取代基的青蒿素衍生物(ART1、ART2和ART3),利用肺癌细胞系H1299和A549比较了它们以及青蒿素(QHS)及其衍生物双氢青蒿素(DHA)的抗肿瘤活性。发现ART1,一种含有萘环的青蒿素衍生物,对肺癌细胞表现出最强的细胞毒性。在肿瘤类器官模型和白血病MV4细胞中均证明ART1是最有效化合物。此外,ART1表现出对正常细胞的抗增殖活性非常弱。结果表明ART1是一种有前途的潜在抗癌药物。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px]图1 ART1抑制肿瘤生长[/size] [size=14px]2、ART1诱导非经典铁死亡[/size] [size=14px]先前的报告表明青蒿素通过多种方式导致癌细胞死亡,包括细胞凋亡、自噬等。作者发现ART1触发的细胞死亡与凋亡、自噬无关。进一步确定ART1诱导癌细胞死亡的机制,发现ART1诱导的细胞死亡仅被铁死亡抑制剂ferrostatin-1(可防止脂质过氧化物的积累)抑制,而不能被细胞凋亡抑制剂z-VAD-FMK或坏死性凋亡抑制剂necrostatin-1抑制,表明ART1处理触发铁死亡。此外,ART1处理会诱导脂质过氧化,且ART1引起的脂质过氧化是铁依赖性的。深入机制研究发现ART1导致铁死亡已知类别的铁死亡诱导剂不同,它不影响其细胞内GSH水平和GPX4活性。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px]图2 ART1诱导非经典铁死亡[/size] [size=14px]3、鉴定HSD17B4蛋白作为ART1的直接靶标[/size] [size=14px]为了确定ART1介导诱导铁死亡的蛋白靶点,作者设计了并合成了ART16(生物素标记的ART1)来开展Pulldown。ART16类似于ART1可诱导铁死亡,可用于后续实验。Pulldown+蛋白质组学分析显示HSD17B4蛋白为可能靶点, BLI、Pulldown+WB技术证实了两者的直接结合。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px]图3 鉴定HSD17B4蛋白作为ART1的直接靶标[/size] [size=14px]4、ART1通过HSD17B4蛋白介导癌细胞死亡[/size] [size=14px]作者采用ART99(含有香豆素荧光团的ART1探针),发现ART99与靶蛋白HSD17B4的共定位。通过敲低HSD17B4来研究ART1诱导的细胞死亡是否由HSD17B4介导,发现HSD17B4敲低可显著减弱ART1的作用。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px]图4 ART1通过HSD17B4蛋白介导癌细胞死亡[/size] [size=14px]5、ART1靶HSD17B4蛋白直接诱导脂质氧化[/size] [size=14px]HSD17B4蛋白是一种双功能酶,同时具有脱氢酶和水合酶活性,并参与VLCFA(极长链脂肪酸)的过氧化物酶体β氧化。作者发现ART1并未改变细胞中HSD17B4蛋白丰度,也不影响其脱氢酶和水合酶活性。由于ART1中的过氧化物部分对于诱导铁死亡是必不可少的,作者推测ART1可能是一种启动铁死亡的选择性氧化剂,与HSD17B4结合并促进周围脂质的氧化。作者验证发现ART1可以直接氧化铁死亡相关底物。PUFA,易受脂质过氧化的影响,是执行铁死亡所必需的。由于不容易获得超长链多不饱和脂肪酸,AA被用作替代物,作者发现ART1单独可以氧化AA,ART1还可以显著促进由亚铁离子催化的脂质过氧化。此外,活细胞成像探针发现ART1可以氧化细胞中HSD17B4蛋白周围的脂质。这些数据证实ART直接氧化HSD17B4蛋白周边的脂质,积累脂质过氧化物,并最终在癌细胞中促进铁死亡。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px]图5 ART1靶向HSD17B4蛋白直接诱导脂质氧化[/size] [size=14px]6、ART1优先诱导高间充质状态癌细胞的铁死亡[/size] [size=14px]据报道,高间充质状态的耐药性癌细胞对铁死亡诱导剂敏感。作者检测这些肺癌细胞的上皮间充质状态,发现对ART1敏感细胞系H1299和H1838中的波形蛋白含量较高,表明高间充质状态,而对ART1耐药细胞系HCC366和H1650几乎表现出E-钙粘蛋白的丰度检测不到,这表明ART1的敏感性与癌细胞上皮间充质状态密切相关,ART1可优先诱导间充质癌细胞发生铁死亡。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px]图6 ART1优先诱导高间充质状态癌细胞的铁死亡[/size] [size=14px]总结[/size] [size=14px]该研究将青蒿素衍生ART1已被确定为铁死亡诱导剂,对癌细胞增殖具有显著的抑制效果。接着使用化学蛋白质组学方法鉴定HSD17B4蛋白,一种在VLCF分解代谢中必不可少的酶,作为ART1的直接靶点。进一步研究发现ART1会导致铁死亡,通过直接氧化HSD17B4蛋白周围的脂肪酸而不干扰蛋白质的正常酶活性,揭示了一种意想不到的机制,其中ART1-HSD17B4用作“特洛伊木马”,潜入过氧化物酶体触发脂质氧化。总之,ART1通过靶向HSD17B4诱导铁死亡提供了一种有希望的癌症治疗方法。[/size]