纯化工艺

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纯化工艺相关的资讯

  • 博格隆线上研讨会 | 抗体类药物下游纯化工艺关键要素解析
    抗体药物生产是个非常复杂的过程,工艺步骤繁多,大致分为上游细胞培养和下游分离纯化。近年来,上游的关键技术不断进行创新,细胞株开发技术不断提升,细胞培养基也不断地优化,上游的表达量从以往的1g/L普遍提高至5~10g/L,大幅降低了上游细胞培养成本。而相较于上游工艺的相对成熟,下游分离纯化技术则进步缓慢,自动化程度较低,导致下游工序成为抗体药物的生产瓶颈,抗体主要生产成本也转移到下游,制约着抗体药物进入临床直至到商业化。一般来说,抗体的纯化可以分为三个连续的阶段:亲和捕获、中度纯化和精细纯化。然而,基于前述的行业现状,如何针对不同的抗体分子制定更高效的整体纯化策略,如何在每个工艺步骤设计更合适的纯化方法,如何在确保纯化效率的基础上降低生产成本,就显得尤为重要。由此,2024年9月26日下午15:00~16:00,博格隆联合佰傲谷,特别策划了本期线上研讨会,围绕抗体类药物下游纯化工艺关键要素进行深入解析,结合实战经验探寻更经济高效的纯化解决方案!(报名链接可至博格隆官网查看)嘉宾介绍万艳 药明生物下游工艺开发部主任万艳,在抗体下游工艺开发上有10多年经验,能运用各类层析去除杂质并提高抗体纯度。已在国际期刊上发表近20篇专业文章。贾秋品 博格隆资深层析介质应用专家贾秋品博士,毕业于东华大学与瑞典卡罗琳斯卡学院。曾先后任职于国内外知名公司工艺开发部门,拥有深厚的生物制药下游纯化工艺开发背景。在层析工艺开发及填料应用方面具有多年的深入研究和操作经验,曾参与多个生物制药纯化项目的工艺开发与放大。关于博格隆博格隆成立于2008年,是一家专注于为分离纯化提供高质量层析介质的高新技术企业,是中国较早具备大规模生产分离纯化介质能力的企业之一。博格隆所提供的产品涵盖各类分离纯化介质、预装柱、实验室及工业生产级空柱、微载体,同时提供分离纯化工艺开发服务及填料定制。
  • 【新品发布】SkillPak预装层析柱再添新品,更易实现纯化工艺优化及放大
    东曹生命科学(Tosoh Bioscience)是全球知名的色谱分离解决方案供应商,近日宣布对现有SkillPak预装柱产品线进行了拓展,推出了2.5 cm I.D.和5.0 cm I.D.两种规格的层析柱新品,用于单克隆抗体、抗体片段、ADC、寡核苷酸以及病毒等生物大分子的纯化工艺开发。关于SkillPak预装层析柱SkillPak预装填有亲和、阴/阳离子交换、疏水以及尺寸排阻等各种分离模式的TOYOPEARL或TSKgel层析填料,性能卓越、稳定可靠,可与常用的低压或中压液相色谱层析系统配合使用。SkillPak不仅可以重复再生使用,还充分考虑了每种填料不同的装填压缩比,能够精确展示各种尺寸层析柱的纯化效果。公司现有产品1 mL和5 mL SkillPak主要用于纯化工艺开发或变更时进行参数和方法的优化,以及耐用性的测试等。此次新上市的50 mL和200 mL规格的层析柱可将开发好的纯化工艺线性放大。SkillPak预装层析柱的应用1. 抗体纯化工艺中洗脱pH值的确定在mAb纯化工艺中,找到适合mAb洗脱的缓冲溶液和pH值,可降低样品中聚集体增加的风险。为了确定mAb结合和洗脱的最佳条件,我们将含CHO细胞培养上清液的mAb进样至预装有TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F填料的SkillPak层析柱中。图1. 使用1 mL和5 mL SkillPak确定mAb洗脱pH值图1中的A和B显示了使用线性pH值梯度在pH 3.5时获得尖锐的mAb组分峰 (洗脱最大)。为了最大程度地提高回收率,可选择pH 3.3~3.5进行分步洗脱。2. 下游工艺的无缝放大我们使用装填了阴离子交换填料TOYOPEARL NH2-750F的不同尺寸的SkillPak层析柱分离蛋白标准品。下图中蛋白标准品的分离结果显示,不同尺寸层析柱上其洗脱曲线相似,证明了SkillPak出色的放大能力。图2. 不同尺寸的SkillPak分离蛋白标准品同时,我们还在5 mL、50 mL和200 mL的SkillPak层析柱上测定了牛血清白蛋白 (BSA) 的动态吸附载量。BSA在不同尺寸的SkillPak上动态吸附载量值非常接近,最大偏差为4%,表明吸附能力与层析柱尺寸无关,这一点对于工艺放大时的上样量来说非常重要。表1. 不同尺寸SkillPak上BSA的动态吸附载量如您想了解SkillPak预装柱的详细信息,欢迎联系我们索取产品资料或申请免费试用。Tel:400-825-6296
  • 艾力特2017下游连续纯化工艺研讨会圆满结束
    当前,未来制药工厂,包含了新的设备、现有药品生产设备的更新换代和技术改造,以满足更经济高效的生产需求,更小的产品生产批次,更高的灵活性以及新的监管需求。其中,连续生产工艺技术以及一次性生物技术设备解决方案都是当下讨论的热门话题,正在迅速成为得到业界认可的技术,现有工厂当中的可重用设备也正在为一次性系统所取代。以此为契机,为了促进生物制药领域客户更好的了解生物制药新技术,把握生物制药下游生产新工艺,获知最先进的应用案例,探讨行业发展新趋势。艾力特国际贸易有限公司携手美国Repligen公司于11月2日在上海举办了一场主题为“下游连续纯化工艺研讨会”的研讨会,来自国内许多知名药企的专家学者、企业代表参加了此次会议。会上,Repligen 副总裁Christine Gebski带来了主题为“下游纯化工艺”的精彩演讲,并为大家详细介绍了OPUS预装柱。而Repligen的TangenX产品总监Michael LaBreck则通过现场生动的样机演示,为大家形象地展示了一次性切向流过滤工艺膜包解决方案。

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  • 发酵液中透明质酸提取纯化工艺的研究

    【序号】:2【作者】:宋磊孟国庆郭燕风【题名】:发酵液中透明质酸提取纯化工艺的研究【期刊】:山东农业科学. 【年、卷、期、起止页码】:2017,49(03)【全文链接】:https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iAEhECQAQ9aTiC5BjCgn0RuvaCO5y_ujfIj_U2lrF2sJMqLLz4KNFK027DeDBjoPN&uniplatform=NZKPT

  • 【第二届原创参赛】包涵体的复性及离子交换层析纯化工艺研究

    [color=#dc143c]最近版里原创热风呼呼的刮~~于是我也特来跟风积极参与!近来一直在做包涵体的复性与纯化,就特来与大家分享,希望大家多多支持、指点[em09511][/color][b]1.包涵体的分离纯化[/b] 蛋白质的纯化是基因工程下游的关键内容,以包涵体形式表达的重组蛋白质的纯化研究一直是重组基因工程药物研究中的热点和难点。重组蛋白在宿主系统中高水平表达时,无论是用原核表达体系或酵母表达体系甚至高等真核表达体系,都可形成包涵体。蛋白表达后的分离纯化对蛋白的规模化生产也是至关重要的,所以本实验通过采用稀释复性、透析复性、离子交换层析、凝胶过滤层析等实验方法,研究探讨对分离纯化以及蛋白复性的最佳方法和条件。[b]1.2.1包涵体的复性[/b] 重组蛋白质在分离纯化的过程中, 必须维持一定的浓度和生物活性形式, 以及防止被降解。从包涵体中获得有生物活性的蛋白,需要寻找一种简单而有效的复性方法。在小规模的蛋白复性研究及其进一步的纯化中,稀释复性是最常用的方法。但是稀释复性在商业规模生产中具有一定的缺陷,如需要较大体积的复性液,以及需要附加的浓缩步骤。许多其他方法也已发展起来,例如:透析、渗透、低分子量辅助物添加复性、离子和无离子表面活性剂辅助复性、聚乙烯乙二醇辅助复性等方法。 在折叠反应中,从伸展态到中间体的速度是非常快的,只需要几毫秒,但从中间体转变为天然态的过程比较缓慢,是一个限速过程。聚集过程与复性过程相互竞争,故而应尽量避免聚集体的产生。一般认为,蛋白质在复性过程中涉及两种疏水作用,一是分子内的疏水相互作用,可促进蛋白质正确折叠 一是部分折叠的肽链分子间的疏水相互作用,在复性过程中,部分折叠的中间体的疏水簇外露,分子间的疏水相互作用会导致蛋白质聚集。蛋白质的立体结构虽然由其氨基酸的顺序决定,然而伸展肤链折叠为天然活性结构的过程还受到周围环境的影响,如温度、pH值、离子强度、复性时间等因素的影响。[b]1.2.2包涵体离子交换层析纯化[/b] 为了获得高纯度的活性蛋白, 需要对复性的蛋白质进行进一步纯化。根据分离目标蛋白的特点(如P I、疏水性、氨基酸组成, 分子量大小、表面电荷的分布状况) , 然后确定分离方法, 从而正确选择最有效的分离介质,本实验采用SP Sepharose F.F 阳离子交换层析分离纯化重组蛋白 离子交换层析是以蛋白质分子净电荷和表面电荷分布为分离基础的。具体说就是利用蛋白质带电性的差异,在离子吸附剂上静电吸附能力不同,用不同的pH 离子强度洗脱液洗脱,从而使蛋白质分离的柱层析方法。离子交换又分为阴离子交换和阳离子交换。离子交换剂又有强弱之分,强的离子交换剂在整个pH 范围内都是离子化的,而弱的离子交换剂通常仅在pH6~9 之间是离子化状态,因而后者对所适用的pH 范围又有了进一步的限制。 在洗脱方式上,阳离子交换主要是改变pH ,它主要应用于等电点大于5 的蛋白质。20 种氨基酸中,大部分带正电或负电,这是IEC 应用范围广的原因。离子交换层析处理量大,附载系数高,一步缩小样品体积很多。离子交换层析去除杂质能力强,如对热原质,核酸、及电荷性有差别的蛋白均可去除。它还有一个特点,利用蛋白质在不同pH 和盐浓度下带电性的不同,通过不同条件下应用同种类型或不同类型介质,分步使目标蛋白质达到提纯目的,这是除亲和柱层析外,别的柱层析达不到的分离能力。离子交换层析原则上可放在纯化工艺的任何一步,它属吸附型层析,单步损失也较大。

纯化工艺相关的资料

纯化工艺相关的仪器

  • SD-1 纯化系统 400-629-8889
    Agilent SD-1 纯化系统在无可比拟的流速范围内具有公认的梯度准确度和重现性,是全球化学家和工艺工程师的首选系统。采用一套配置您即可进行筛选运行,并放大至克或数百克。标准系统非常适用于从 1 mL/min 放大到 200 mL/min,可轻松升级到 500 mL/min 流速。将 SD-1 溶剂输送模块与 Agilent 410 自动进样器、325 UV-Vis 双波长检测器和 440 馏分收集器组合使用,可纯化更复杂的样品。分析和制备应用均使用 OpenLAB CDS ChemStation 软件。产品特点:● 使用各种体积定量环进行手动进样或自动进样(最多 10 mL 样品体积)● 准确的流速控制、高压混合和独立的活塞控制实现了卓越的重现性● 带可更换泵头的精确溶剂输送(高达 200 mL/min、500 mL/min 或 800 mL/min),可以充分发挥出高效预装柱或 Agilent Load & Lock 柱的潜能● 双波长 UV-Vis 检测器配备独特的双光程流通池,动态范围比常规检测器高 40 倍● 精确、可重现的馏分收集,既可以日复一日地基于时间,也可以基于实时 UV 峰检测运算 — 带开床式 Agilent 440 馏分收集器● 易于使用的软件与液相色谱分析所熟知的 Agilent OpenLab CDS 软件配合使用,可对纯化过程进行无人值守地运行或交互式控制
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  • QIAcube HT 是一个高通量的自动化工作平台,每轮可以从多达96 个样品中快速、可靠地纯化高质量的核酸。仪器机身小巧却可在70–90 分钟内完成96 个样品的纯化。革新的设备最小化任何污染的可能。优化的试剂允许其从几乎所有类型的样本,包括液体和固体样本中纯化核酸。纯化所得的核酸广泛适用于各种敏感的下游应用,如生物医学研究、基因分型和基因组学研究等。QIAcube HT特点一览 优化的程序和试剂保障出色的纯化表现,即使是针对疑难样本 全新的图形化软件界面和革新的安全防护,确保便利性和可靠性 小巧的体积方便使用 快速的纯化操作,96个样品仅需70–90分钟 通过运行前与运行后报告可追溯整个操作过程 创新的生物安全防护 HEPA空气过滤器保护并维持罩内工作台上正向洁净的气压 用过的吸头被弃置在工作平台外部,保证了工作环境中没有废物的堆积 优化的真空腔设计为洗涤与洗脱步骤提供了独立的组件,将交叉污染的可能性最小化 可更换的PolyCap滤器保护真空泵,活性炭滤器净化废气 在必要时可通过硅胶管与安全柜或通风橱相连,排出废气 紫外灯有效去除工作台污染优化的软硬件和试剂硬件QIAcube HT外观紧凑,桌面部分仅占很小的空间。为进一步提高方便性,真空泵及废液组件被置于实验台下方,以节约空间。为增加灵活性,并与紧凑的理念相一致,QIAcube HT 可由笔记本电脑控制。软件方便的设置,全新图形化设计,配备全新的QIAcube HT Prep Manager灵活、向导式的软件。有了方便的软件向导,操作人员无需专门的培训。软件的界面模拟了仪器的工作平台以方便快速和简单的程序设置,试剂使用的体积由软件根据样品的数目而自动计算。试剂优化且经济试剂确保纯化表现。QIAcube HT 采用久经考验的QIAGEN 硅胶模技术纯化核酸。多种试剂盒针对不同样本类型,实现高效的基因组DNA、RNA(包括总RNA 和miRNA),病毒和细菌核酸的纯化。 与您的工作流程无缝结合QIAcube HT 可以与您的工作流程无缝的整合, 并与QIAGEN下游分析与检测技术完全兼容。纯化所得的核酸被收集在特殊设计的96个独立的管子里,方便与下游不同应用的整合。洗脱板上含有装有纯化所得核酸的管子,可以将其转移至QIAgility 自动化体系构建工作站上进行全自动的PCR 反应体系构建。接下来可以在Rotor-Gene Q 上进行实时定量PCR 或RT-PCR分析。对多种核酸片段的分离和分析,包括单重或多重PCR 片段可以在QIAxcel Advanced 全自动毛细管电泳系统上完成,它克服了传统凝胶电泳的诸多瓶颈问题。
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  • MOBIUS一体式即用式纯化产品密理博(Millipore)公司生物工艺部门长期致力于为制药企业及生物制品公司提供高品质的纯化设备和技术服务,以及生产过程和最终产品的微生物检测技术。公司根据目前行业内产品的多样性,生产中验证清洗的繁复要求,汇集一流的专业技术和易于使用操作的即用型技术,为您提供Mobius灵活的生物工艺解决方案,作为一种成熟完善的产业化解决方案可用于提高您生物工艺的性能、速度和效率。Mobius即用型完整解决方案可取代传统的不锈钢管道及容器的操作。由一系列模块化的技术及服务构成,可整合成一个完整的产业化方案,Mobius将会根据您生产工艺的特殊需要将各个部分整合为一个完整的可验证的系统。无论是塑料材料之间的连接,还是塑料同不锈钢之间的连接,Mobius技术都可提供更多的灵活性并易于整合入现有生产系统。 Mobius方案将提供:简化的验证和清洁迅速的周转时间生产产品多样化的设备灵活性工艺连贯性和安全性上的优化控制低成本
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纯化工艺相关的耗材

  • SkillPak层析工艺优化填料筛选预装柱
    SkillPak 1 mL和5 mL层析柱主要用于快速实现纯化方法的开发及优化、填料的筛选以及样品的浓缩。两种不同尺寸层析柱都预装填了各类TOYOPEARL、TSKgel以及Ca++Pure-HA羟基磷灰石填料,能够对单克隆抗体、蛋白质、寡核苷酸以及病毒进行出色的纯化评价、评估。SkillPak 1 mL和5 mL预装柱为从平台工艺开发到中试规模纯化而设计。这类预装层析柱一经收到即可立即投入使用,由于具有优异的刚性强度和理想的压力/流速特性,尤其适合下游纯化工艺。SkillPak层析柱性能卓越、稳定可靠,可与常用的低压或中压液相色谱/层析系统配合使用。该类层析柱不仅可以重复再生使用,还充分考虑了每种填料不同的装填压缩比。因此,能够精确展示各种尺寸层析柱的代表性状态。SkillPak 1 mL层析柱的规格参数: SkillPak 5 mL层析柱的规格参数:
  • 70502Beaver钴离子螯合磁珠蛋白纯化磁珠
    His-tag蛋白纯化磁珠BeaverBeads™ His-tag Protein Purification磁珠(组氨酸标签蛋白纯化琼脂糖磁珠)是专为高效、快速纯化组氨酸标签蛋白而设计的一种新型功能化材料,可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白,显著地简化了纯化工艺,降低了设备需求,适合科研和工业领域便捷快速地进行组氨酸标签蛋白的纯化工作。对比传统的过柱层析纯化方式, His-tag Protein Purification磁珠通过磁性分离方式纯化组氨酸标签蛋白,无需对粗蛋白样品进行多次费时费力的离心、过滤步骤,无需装柱和过柱层析,无需昂贵的柱层析设备,在1小时内便能便捷地获得高产量和高纯度的目的蛋白,且能轻松实现多样品平行处理,显著提高了工作效率,大大降低了设备、时间和人工成本.本产品系列包括镍离子(Nickel)和钴离子(Cobalt)两种金属离子螯合磁珠。它们在目标蛋白结合量及所得目标蛋白纯度上有所差异,一般推荐客户使用镍离子螯合磁珠,大多数情况下能满足客户对蛋白载量和纯度的要求;对纯度要求更高的客户推荐使用钴离子螯合磁珠。His-tag Protein Purification磁珠广泛适用于细菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞等分泌或胞内表达的可溶性组氨酸标签蛋白以及变性蛋白的纯化。产品名称编号规格包装单价BeaverBeads™ IDA-Nickel70501-510%(v/v)5mL¥BeaverBeads™ IDA-Nickel70501-10010%(v/v)2x50mL¥BeaverBeads™ IDA-Nickel70501-100010%(v/v)4x250mL¥BeaverBeads™ IDA-Nickel Kit-1070501-K1010rxns试剂盒¥BeaverBeads™ IDA-Cobalt70502-510%(v/v)5mL¥BeaverBeads™ IDA-Cobalt70502-10010%(v/v)2x50mL¥BeaverBeads™ IDA-Cobalt70502-100010%(v/v)4x250mL¥BeaverBeads™ IDA-Cobalt Kit-1070502-K1010rxns试剂盒¥1.可从粗样品直接纯化目标蛋白,极大的缩短纯化时间2. 可轻松实现对目标蛋白浓度和体积的控制通过调节洗脱缓冲液体积的方式,实现对目标蛋白浓度和体积的控制,无蛋白损失,且不存在蛋白变性、沉淀的风险。3. 一步纯化即可获得高纯度目标蛋白海狸磁珠与市场上进口产品相比,一步纯化即得到同水平高纯度的目标蛋白。一个完整的操作流程即可获得纯度可以达到95%以上的目标蛋白。4.平行操作稳定性高,可方便实现高通量和大规模蛋白纯化目的蛋白纯度和产量的标准差均5%。完全不存在流速和样品体积的限制,适用于高通量和大规模蛋白纯化。5.可以获得较高的目标蛋白产率利用海狸磁珠对粗样品进行纯化,一步完整的纯化流程之后,90%以上纯度的目标蛋白,其产率一般达到70~80%。6.可重复使用,再生工艺简单由图A、B可知,海狸磁珠反复进行多达六次再生处理,仍能保持较好的目标蛋白结合能力和纯度。图A. 再生6次后磁珠结合目标蛋白检测图谱 图B. 再生6次后磁珠的蛋白结合量数据图7. 镍螯合磁珠与钴螯合磁珠对不同分子量的His-tag蛋白纯化对比? Co离子螯合磁珠蛋白结合量比Ni离子螯合磁珠稍低,但纯度更高;? Co离子螯合磁珠洗涤和洗脱所用咪唑浓度都比Ni离子螯合磁珠低。图A.镍和钴螯合磁珠纯化His-tag Lif 蛋白 图B.镍和钴螯合磁珠纯化M-MLv蛋白(分子量~ 50KD)对比 (分子量~ 70KD)对比引用文献:Overexpression of a cysteine proteinase inhibitor gene from Jatropha curcas confers enhanced tolerance to salinity stress;ELECTRONIC JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 卷: 18 期: 5 页: 368-375 出版年: SEP 2015Production and Stabilization of an Integrin Binding Moiety of Complement Component 3;MOLECULAR BIOLOGY 卷: 49 期: 5 页: 723-727 出版年: SEP 2015The role of semaphorin 4D as a potential biomarker for antiangiogenic therapy in colorectal cancer;ONCOTARGETS AND THERAPY 卷: 9 页: 1189-1204 出版年: 2016血红铆钉菇免疫调节蛋白基因克隆及其生物信息学分析和重组表达;沈阳农业大学学报Innovation Spaces in Asia: Entrepreneurs, Multinational Enterprises and Policy;登革病毒四型联合重组包膜蛋白III 区的表达和免疫原性鉴定*;中国生物工程杂志Quantitative Proteomic Analysis of Escherichia coli Heat-Labile Toxin B Subunit (LTB) with Enterovirus 71 (EV71) Subunit VP1;INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES 卷: 17 期: 9 文献号: 1419 出版年: SEP 2016人C-Src 蛋白酪氨酸激酶真核表达, 纯化及活性检测;生物技术通报人酪氨酸蛋白激酶Lyn的真核表达、纯化及鉴定;生物技术一个麻风树Kunitz型蛋白酶抑制剂基因的克隆和鉴定;四川大学学报(自然科学版)锌离子依赖金属蛋白酶1(Zmp1)抑制小鼠RAW264.7细胞增殖以及吞噬体-溶酶体的融合;细胞与分子免疫学杂志A Novel Assay for Screening Inhibitors Targeting HIV Integrase LEDGF/p75 Interaction Based on Ni2+ Coated Magnetic Agarose Beads;SCIENTIFIC REPORTS 卷: 6 文献号: 33477 出版年: SEP 16 2016Eukaryotic expression,protein purification and identification of human tyrosine-protein kinase Lyn;The role of semaphorin 4D as a potential biomarker for antiangiogenic therapy in colorectal cancer;ONCOTARGETS AND THERAPY 卷: 9 页: 1189-1204 出版年: 2016Design, Recombinant Fusion Expression and Biological Evaluation of Vasoactive Intestinal Peptide Analogue as Novel Antimicrobial Agent;Molecules 2017, 22, 1963 DOI:10.3390/molecules22111963The thermoduric effects of site-directed mutagenesis of proline and lysine on dextransucrase from Leuconostoc mesenteroides 0326;International Journal of Biological Macromolecules,DOI:10.1016/j.ijbiomac.2017.10.023GR1-like gene expression in Lycium chinense was regulated by cadmium-induced endogenous jasmonic acids accumulation;Plant Cell Rep (2017) 36:1457–1476, DOI:10.1007/s00299-017-2168-2Development of a peptide ELISA to discriminate vaccine-induced immunity from natural infection of hepatitis A virus in a phase IV study;Eur J Clin Microbiol Infect Dis (2017) 36:2165–2170, DOI:10.1007/s10096-017-3040-6
  • His-tag蛋白纯化Beaver镍离子螯合磁珠
    His-tag蛋白纯化磁珠BeaverBeads™ His-tag Protein Purification磁珠(组氨酸标签蛋白纯化琼脂糖磁珠)是专为高效、快速纯化组氨酸标签蛋白而设计的一种新型功能化材料,可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白,显著地简化了纯化工艺,降低了设备需求,适合科研和工业领域便捷快速地进行组氨酸标签蛋白的纯化工作。对比传统的过柱层析纯化方式, His-tag Protein Purification磁珠通过磁性分离方式纯化组氨酸标签蛋白,无需对粗蛋白样品进行多次费时费力的离心、过滤步骤,无需装柱和过柱层析,无需昂贵的柱层析设备,在1小时内便能便捷地获得高产量和高纯度的目的蛋白,且能轻松实现多样品平行处理,显著提高了工作效率,大大降低了设备、时间和人工成本.本产品系列包括镍离子(Nickel)和钴离子(Cobalt)两种金属离子螯合磁珠。它们在目标蛋白结合量及所得目标蛋白纯度上有所差异,一般推荐客户使用镍离子螯合磁珠,大多数情况下能满足客户对蛋白载量和纯度的要求;对纯度要求更高的客户推荐使用钴离子螯合磁珠。His-tag Protein Purification磁珠广泛适用于细菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞等分泌或胞内表达的可溶性组氨酸标签蛋白以及变性蛋白的纯化。产品名称编号规格包装单价BeaverBeads™ IDA-Nickel70501-510%(v/v)5mL¥BeaverBeads™ IDA-Nickel70501-10010%(v/v)2x50mL¥BeaverBeads™ IDA-Nickel70501-100010%(v/v)4x250mL¥BeaverBeads™ IDA-Nickel Kit-1070501-K1010rxns试剂盒¥BeaverBeads™ IDA-Cobalt70502-510%(v/v)5mL¥BeaverBeads™ IDA-Cobalt70502-10010%(v/v)2x50mL¥BeaverBeads™ IDA-Cobalt70502-100010%(v/v)4x250mL¥BeaverBeads™ IDA-Cobalt Kit-1070502-K1010rxns试剂盒¥1.可从粗样品直接纯化目标蛋白,极大的缩短纯化时间2. 可轻松实现对目标蛋白浓度和体积的控制通过调节洗脱缓冲液体积的方式,实现对目标蛋白浓度和体积的控制,无蛋白损失,且不存在蛋白变性、沉淀的风险。3. 一步纯化即可获得高纯度目标蛋白海狸磁珠与市场上进口产品相比,一步纯化即得到同水平高纯度的目标蛋白。一个完整的操作流程即可获得纯度可以达到95%以上的目标蛋白。4.平行操作稳定性高,可方便实现高通量和大规模蛋白纯化目的蛋白纯度和产量的标准差均5%。完全不存在流速和样品体积的限制,适用于高通量和大规模蛋白纯化。5.可以获得较高的目标蛋白产率利用海狸磁珠对粗样品进行纯化,一步完整的纯化流程之后,90%以上纯度的目标蛋白,其产率一般达到70~80%。6.可重复使用,再生工艺简单由图A、B可知,海狸磁珠反复进行多达六次再生处理,仍能保持较好的目标蛋白结合能力和纯度。图A. 再生6次后磁珠结合目标蛋白检测图谱 图B. 再生6次后磁珠的蛋白结合量数据图7. 镍螯合磁珠与钴螯合磁珠对不同分子量的His-tag蛋白纯化对比? Co离子螯合磁珠蛋白结合量比Ni离子螯合磁珠稍低,但纯度更高;? Co离子螯合磁珠洗涤和洗脱所用咪唑浓度都比Ni离子螯合磁珠低。图A.镍和钴螯合磁珠纯化His-tag Lif 蛋白 图B.镍和钴螯合磁珠纯化M-MLv蛋白(分子量~ 50KD)对比 (分子量~ 70KD)对比引用文献:Overexpression of a cysteine proteinase inhibitor gene from Jatropha curcas confers enhanced tolerance to salinity stress;ELECTRONIC JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 卷: 18 期: 5 页: 368-375 出版年: SEP 2015Production and Stabilization of an Integrin Binding Moiety of Complement Component 3;MOLECULAR BIOLOGY 卷: 49 期: 5 页: 723-727 出版年: SEP 2015The role of semaphorin 4D as a potential biomarker for antiangiogenic therapy in colorectal cancer;ONCOTARGETS AND THERAPY 卷: 9 页: 1189-1204 出版年: 2016血红铆钉菇免疫调节蛋白基因克隆及其生物信息学分析和重组表达;沈阳农业大学学报Innovation Spaces in Asia: Entrepreneurs, Multinational Enterprises and Policy;登革病毒四型联合重组包膜蛋白III 区的表达和免疫原性鉴定*;中国生物工程杂志Quantitative Proteomic Analysis of Escherichia coli Heat-Labile Toxin B Subunit (LTB) with Enterovirus 71 (EV71) Subunit VP1;INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES 卷: 17 期: 9 文献号: 1419 出版年: SEP 2016人C-Src 蛋白酪氨酸激酶真核表达, 纯化及活性检测;生物技术通报人酪氨酸蛋白激酶Lyn的真核表达、纯化及鉴定;生物技术一个麻风树Kunitz型蛋白酶抑制剂基因的克隆和鉴定;四川大学学报(自然科学版)锌离子依赖金属蛋白酶1(Zmp1)抑制小鼠RAW264.7细胞增殖以及吞噬体-溶酶体的融合;细胞与分子免疫学杂志A Novel Assay for Screening Inhibitors Targeting HIV Integrase LEDGF/p75 Interaction Based on Ni2+ Coated Magnetic Agarose Beads;SCIENTIFIC REPORTS 卷: 6 文献号: 33477 出版年: SEP 16 2016Eukaryotic expression,protein purification and identification of human tyrosine-protein kinase Lyn;The role of semaphorin 4D as a potential biomarker for antiangiogenic therapy in colorectal cancer;ONCOTARGETS AND THERAPY 卷: 9 页: 1189-1204 出版年: 2016Design, Recombinant Fusion Expression and Biological Evaluation of Vasoactive Intestinal Peptide Analogue as Novel Antimicrobial Agent;Molecules 2017, 22, 1963 DOI:10.3390/molecules22111963The thermoduric effects of site-directed mutagenesis of proline and lysine on dextransucrase from Leuconostoc mesenteroides 0326;International Journal of Biological Macromolecules,DOI:10.1016/j.ijbiomac.2017.10.023GR1-like gene expression in Lycium chinense was regulated by cadmium-induced endogenous jasmonic acids accumulation;Plant Cell Rep (2017) 36:1457–1476, DOI:10.1007/s00299-017-2168-2Development of a peptide ELISA to discriminate vaccine-induced immunity from natural infection of hepatitis A virus in a phase IV study;Eur J Clin Microbiol Infect Dis (2017) 36:2165–2170, DOI:10.1007/s10096-017-3040-6
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