色谱涂壁开管

开管毛细管电色谱进展毛细管电色谱（capillary electrochromatography， 简称CEC）是近年发展起来的一种高效、 快速的新型微柱分离方法。它在毛细管柱内填充液相色谱固定相或在柱壁键合固定相， 以电渗流驱动流动相， 溶质根据它们在固定相和流动相之间分配及其电泳淌度的不同而得以分离的一种电分离模式 。CEC以具有塞子流型的电渗流代替了具有抛物线流型的压力流， 因而具有毛细管区带电泳(CZE)的高效性。 CEC采用液相色谱的固定相和流动相， 因而还具有高效液相色谱(HPLC)的高选择性。 由此可见， CEC既克服了CZE选择性差和分离中性化合物困难的弱点，又克服了胶束电动色谱 (MEKC)的胶束选择有限的缺点， 因此， 从1974年Pretorious等第一次实现CEC分离以来，CEC已受到越来越广泛的关注，尤其是进入90年代以后，这一领域的论文呈指数增长 ，并于1997年8月在美国California召开了第一届毛细管电色谱会议。

[b]毛细管色谱柱固定液的涂渍方法[/b]（1）壁开管柱（wall coated open tubular, WOCT）将固定液直接涂在毛细管内壁上，这是戈雷最早提出的毛细管柱。由于管壁的表面光滑，润湿性差，对表面接触角大的固定液，直接涂渍制柱，重现性差，柱寿命短，现在的WCOT柱，其内壁通常都先经过表面处理，以增加表面的润湿性，减小表面接触角，在涂固定液。（2）多孔层开口柱（porous layer open tubular, PLOT）在管壁上涂一层多孔性吸附剂固体微利，不再涂固定液，实际上是使用开管柱的气固色谱。（3）载体涂渍开管柱（support coated open tubular, SCOT）为了增大开管柱内固定液的涂渍量，现在毛细管内壁涂上一层很细的（＜2μm）多孔颗粒，然后在多孔层上涂渍固定液，这种毛细管柱，液膜较厚，因此柱容量较WCOT柱高。（4）化学键合相毛细管柱 将固定相用化学键合的方法键合到硅胶涂敷的柱表面和径表面处理的毛细管内壁上。经过化学键合，大大提高了柱的热稳定性。（5）交联毛细管柱 由交联引发剂将固定相交联到毛细管管壁上。这类柱子具有耐高温、抗溶剂抽提、液膜稳定、柱效高、柱寿命长等特点，因此得到迅速发展。

毛细管气相色谱法：高分辨率，柱效高，开管型→挥发油1.开管柱 （1）特点：固定液量很少（2）类型：①壁涂层开管柱→容量低，不适于痕量分析和室温下分析低分子量成分及永久气体。②载体涂层开管柱（SCOT）：应用广，可作痕量组分分析。常用柱：交联弹性石英开管柱（3000多）③大内径厚液膜开管柱：柱容量大，痕量和低分子分析④微内径开管柱：高分离效能。开管柱内径↓，μopt↑，更适用于快速分析。 （3）柱内径：柱内径要兼顾柱效，分析速度和柱容量，0.25～0.53mm。 （4）液膜厚度：df=0.1μm～5μm；df↑，柱容量↑。 （5）柱温：Tc↓，tR↑，毛细管柱常用于程序升温GC。 （6）进样量：n↓10%是最大允许进样量，与柱长、k正比，与n成反比 2.选择毛细管柱： （1）填充柱不能达到分离度（α≥1.015），t长。 （2）b.p≥2℃,选非极性柱；b.p≤2℃，选极性较大柱。 （3）高沸点：选耐热、高温 （4）常用柱（OV—10、OV—210、PEG—20M） 3.进样方式 （1）直接进样：分流（30～50：1）和不分流进样（大内径厚液膜开管柱） （2）顶空进样：在非气态和气态达到平衡后，→吸空气进样 N2吹尾：提高灵敏度；顶空GC：液上气相色谱法或顶空分析法； 优点：含量低；不能直接进样的；最低LOD减小。 基本原理：Ai=fi·pi=fi·γi·pi0·xi →组分 ↓ 组分蒸汽压 γi=1时理想，但其不等于1 当T一定时，气液平衡，若Vs不变，则Cg=C0/（K+ρ）。其中Cg为气相中被测组分浓度，Cs为液相中被测组分浓度，C0为样品中被测组分原始浓度，K=Cs/Cg，为气—液相中被测组分平衡常数。 静态顶空GC装置：？二、手性药物HPLC：纯度检查，分离 三点相互作用：对映体与CSP相互作用的部位，吸引，排斥等。 拆分：直接法（CMP法）和间接法（衍生试剂法） （1）柱前手性衍生化法（GDR法）：高光学温度，速率有时不同，非手性柱，提高检测灵敏度，生物样品分析。 （2）手性流动相拆分法（CMP法）： 手性添加剂：①配基交换型手性添加剂（CLEC） ②CD环糊精：分子大小形成CD化合物 常用：β—CD、γ—CD或改性CD ③手性离子对络合剂（CIPC）。 （3）手性固定相拆分法（CSP）： 蛋白质 π—碱型 三种常用 环糊精 → π—酸型 电荷转移型手性固定相 铜绿 氨基酸型 蛋白质：牛血清蛋白（BSA） CD：疏水性，每个glu有5个手性碳 CDR法：条件简易，普通柱，预分离，光学纬度高。 CMP法：范围的有限，添加剂不稳定，干扰，条件简易，不必柱前衍生化。 CSP法：各类化合物，分析可靠，常规及生物样品，某些需柱前衍生化。三、超高速（UPLC）：速度、灵敏度及分离度为HPLC的9、3、和1.7倍；压力大（140pa）。 1.dp↓，更宽优化线速度 2.dp↓，分离速度↑ 条件：dp2μm；超高压溶剂泵；泵片死体积小；快速自动进样；高速检测系统；更适合LC—MS。四、超临界（SFC）色谱SF为流动相，硅胶或化学键合相为“S”对象：热敏性，低挥发性化合物，比GC广；特点：比HPLC分离制备快，更易于MS、FT—IR和MNR连用。五、高速逆流色谱（HSCCC）high-speed counter-current chronati 1.特点： （1）固定相为液体； （2）不出现，峰畸形，拖尾； （3）回收率↑； （4）制备量大，重现性好； （5）体系更换，平衡方便快捷。 2.基本原理：离心力→混合 梯度洗脱 3.装置：进液部；分离部分；输出部分