批次间纯化分析

4月19日，由中国科学院过程工程研究所作为第一技术支撑单位的国家重大科学仪器设备开发专项&ldquo 生物技术药物纯化分析仪器的开发和应用&rdquo 项目启动会在京召开。科技部条财司和北京市科委领导出席会议。与会专家包括由知名学者组成的技术专家委员会委员、由高校、研究所和企业生物技术药物专家组成的用户专家委员会委员、项目总体组成员及项目监理组成员等。 　　该项目由北京创新通恒科技有限公司牵头，过程工程所作为第一技术支撑单位，北京市理化分析测试中心、北京蛋白质组研究中心、北京双鹭药业股份有限公司等作为主要应用单位。项目内容以开发具有自主创新核心技术的高端通用型生物技术药物纯化分析仪器并实现工程化开发和产业化策划为总目标，开发和完善多通道检测机构的精密分流技术、蛋白质分离介质技术、层析柱分布器技术等 研制一体化多维检测器、多通道检测接口等关键器部件 进行总体优化设计与系统集成，建立稳定的整机生产成套工程技术方法，在工艺加工、质量控制、可靠性测试和环境适应性测试等方面达到国际先进水平。研制出的生物技术药物纯化分析仪器将用于重组蛋白药物、长效蛋白药物、疫苗和血液制品等生物技术药物的分离纯化。 　　项目负责人沈志刚总工程师对项目整体情况作了汇报，过程工程所苏志国研究员作为第一技术支撑单位负责人，对项目的关键技术进行了详细的阐述。与会专家和领导对该项目在促进我国科学仪器装备自主创新能力及先进性方面给予了充分的肯定，同时也提出了许多宝贵意见和建议，认为项目执行期间要注重知识产权的创造和应用，并重视产业化转换过程，更加关注与客户之间的沟通和交流，在应用领域有所突破。 　　启动会上，项目组成员均表示将根据专家的建议和要求，进一步提炼关键科学问题，立足长远，加强协作，深化应用，真正实现自主创新的核心技术，实现工程化开发及产业化策划。

项目概况北京生命科学研究所多光谱激光成像仪及蛋白纯化分析系统采购项目 招标项目的潜在投标人应在北京市西城区宣武门外大街10号庄胜广场中央办公楼北翼13A获取招标文件，并于2022年06月14日 13点30分（北京时间）前递交投标文件。一、项目基本情况项目编号：HCZB2022-094项目名称：北京生命科学研究所多光谱激光成像仪及蛋白纯化分析系统采购项目预算金额：435.0000000 万元（人民币）采购需求：名称、数量、简要技术需求如下：序号货物名称数量简要技术需求1▲多光谱激光成像仪1套… … 3.1检测模式：同位素磷屏成像、荧光成像和密度测定。… … （详见招标文件第六章）2▲蛋白纯化分析系统1套… … 2.1.1 精确的全自动微量柱塞泵，双泵四泵头。… … （详见招标文件第六章）注：1.标注“▲”的，允许提供进口产品；未标注允许采购进口产品的，如投标人所投货物为进口产品，其投标无效。2.本项目共1个包，投标人只可投完整包，不允许将一包中的内容拆开进行投标。合同履行期限：多光谱激光成像仪：合同签订后4个月内完成供货（免税的进口产品为签订外贸合同后）；蛋白纯化分析系统：合同签订后6个月内完成供货（免税的进口产品为签订外贸合同后）。本项目( 不接受 )联合体投标。二、申请人的资格要求：1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定；2.落实政府采购政策需满足的资格要求：（1）投标人不为“信用中国”网站（www.creditchina.gov.cn）中列入失信被执行人和重大税收违法案件当事人名单的投标人，不为中国政府采购网（www.ccgp.gov.cn）政府采购严重违法失信行为记录名单中被财政部门禁止参加政府采购活动的投标人（以开标现场查询为准）；（2）投标人单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商，不得参加同一合同项下的政府采购活动；（3）为采购项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商，不得再参加本次采购活动；3.本项目的特定资格要求：/。三、获取招标文件时间：2022年05月24日 至 2022年05月31日，每天上午9:30至11:30，下午14:00至17:00。（北京时间，法定节假日除外）地点：北京市西城区宣武门外大街10号庄胜广场中央办公楼北翼13A方式：现场领购 获取招标文件需携带以下资料： 1.经办人员需携带法定代表人身份证明书（适用于法定代表人的，加盖投标人公章）或法定代表人授权委托书（适用于非法定代表人的，授权内容需包含其办理本项目购买招标文件等手续，加盖投标人公章、法定代表人签字或盖章），个人有效身份证明文件（居民身份证、护照、军人身份证件、驾驶证其中一项）原件及复印件或扫描件（加盖投标人公章）。 2.如自然人投标的，上述资料仅需签字或盖章即可。 3.经办人应严格遵守北京市政府及相关部门发布的现行关于新冠肺炎疫情防控的有关要求，需配合大厦物业工作人员出示北京健康宝、佩戴N95口罩、进行体温检测及人员信息登记等事宜，自觉做好个人防护。售价：￥200.0 元，本公告包含的招标文件售价总和四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点提交投标文件截止时间：2022年06月14日 13点30分（北京时间）开标时间：2022年06月14日 13点30分（北京时间）地点：北京市昌平区中关村生命科学园路七号二楼北会议室。五、公告期限自本公告发布之日起5个工作日。六、其他补充事宜1.评标方法和标准：采用综合评分法；满分为100分：投标报价部分30分，商务部分36分，技术部分34分。 2. 需要落实的政府采购政策：《中华人民共和国政府采购法》（主席令第68号）、《关于中国环境标志产品政府采购实施的意见》（财库[2006]90号）、《关于调整优化节能产品、环境标志产品政府采购执行机制的通知》（财库[2019]9号）、《国务院办公厅关于建立政府强制采购节能产品制度的通知》（国办发[2007]51号）、《关于开展政府采购信用担保试点工作的通知》（财库[2011]124号）、《关于印发〈政府采购促进中小企业发展管理办法〉的通知》（财库[2020]46号）、《财政部、司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知》（财库[2014]68号）、《关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》（财库[2017]141号）、《北京市财政局关于进一步完善市级科研仪器设备政府采购管理有关事项的通知》（京财采购[2016]2862号）、《财政部关于在政府采购活动中查询及使用信用记录有关问题的通知》（财库[2016]125号）、《关于运用政府采购政策支持脱贫攻坚的通知》（财库[2019]27号）、《北京市财政局北京市生态环境局关于政府采购推广使用低挥发性有机化合物(VOCs）有关事项的通知》（京财采购[2020]2381号）等。3.本公告在中国政府采购网发布。4.由于系统原因，其他未尽事宜及公告显示内容与附件不同的，以附件为准。七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。1.采购人信息名 称：北京生命科学研究所　　　　　地址：北京市昌平区中关村生命科学园路七号　　　　　　　　联系方式：李硕 80726688-8311　　　　　　2.采购代理机构信息名 称：华诚博远工程咨询有限公司　　　　　　　　　　　　地　址：北京市西城区宣武门外大街10号庄胜广场中央办公楼北翼13A　　　　　　　　　　　　联系方式：刘天泽 18500706692　　　　　　　　　　　　3.项目联系方式项目联系人：刘天泽电　话：　　18500706692

利用 Pure C-850 双模式辣椒素纯化分离Pure 应用”1介绍辣椒素主要来源于辣椒属植物，不同种类的辣椒含有不同量的辣椒素，通常辣椒的辣度与其中辣椒素的含量有关。此外，一些其他植物也可能含有少量的辣椒素，例如胡椒、姜等。▲ 辣椒素结构式辣椒素因其抗菌活性可用于生物膜和防污涂料，使其在食品包装、食品保鲜、海洋环境和牙科治疗等方面具有广阔的应用前景。辣椒素在代谢紊乱中也起着至关重要的作用，包括减肥、降压和降低胰岛素的作用。此外，辣椒素通过诱导细胞凋亡和抑制肿瘤细胞的增殖，对预防肺癌、胃癌、结肠癌和乳腺癌等人类癌症有效。先前的研究还表明辣椒素对缓解疼痛和认知障碍有积极作用。辣椒素是瞬时受体电位香草素 1 型 (TRPV1) 的激动剂，可选择性激活 TRPV1，诱导 Ca2+ 流入和相关的信号通路。最近，肠道菌群也参与了一些疾病的治疗，但其对辣椒素作用的影响仍有待深入研究。在天然辣椒中同时存在辣椒素与二氢辣椒素，用硅胶柱层析或正相薄层色谱法（TLC）等传统方法分离这两个结构相似的化合物十分困难。即使用中压快速制备色谱（FLASH）分离纯辣椒素也非常困难，因此往往需要使用中压制备色谱法和高压制备色谱法进行两步纯化。在本次的应用文章中，我们将会展示如何利用两步分离从红辣椒原料中提取 HPLC 峰面积达 95% 以上的辣椒素。2仪器、耗材与试剂仪器：步琦 Pure C-850 中高压一体纯化分离系统步琦 E-800 索氏萃取系统Agilent 1260 Infinity II 液相色谱分析系统▲ Pure C-850 制备色谱系统▲ E-800 索氏萃取系统耗材：VisionHT C18 3μm, 150 x 4.6mmFlashPure Ecoflex Silica 12gBUCHI PrepPure C18 100 &angst , 10 µ m, 250 x 20 mm试剂与样品：市售红辣椒 10g去离子水 4L乙腈（HPLC 级）4L甲醇（AR 级）4L二氯甲烷（AR 级）4L乙醇（AR 级）1L辣椒素标样 99.5% 100mg3实验部分样品准备：将市售红辣椒皮碾碎成粉状，取 5g 置于 E-800 索氏提取器的萃取腔内，溶剂杯内加入 100mL 乙醇，加热等级设定为 13 级，整个提取过程持续 4 小时，制成辣椒皮萃取液。确认辣椒素峰位置：HPLC 条件色谱柱VisionHT C18 3μm, 150 x 4.6mm流速1.5mL/min溶剂 A水溶剂 B乙腈梯度50% 等度，6 分钟紫外波长227nm▲ 辣椒素标样出峰图▲ 辣椒皮萃取液出峰图根据辣椒素标样，我们可以确定辣椒素的出峰位置为 3.884 min，通过这一参数我们可以确认之后每一步分离的馏分位置。辣椒素粗分离：色谱条件（C-850 FLASH 模式）色谱柱FlashPure Ecoflex Silica 12g平衡时间6 分钟流速10 mL/min溶剂 A二氯甲烷溶剂 B甲醇梯度10% 等度，40 分钟紫外波长254nm 227nm 280nm检测器灵敏度高上样量600mg 红辣椒皮粉末上样模式干法上样将 600mg 红辣椒皮粉末与 3g 硅胶拌匀，放入干法上样柱内进行上样，在 C-850 的中压模式下进行初步纯化分离。▲ C-850 中压模式下分离红辣椒皮内的化合物根据之前 HPLC 上辣椒素的出峰位置，我们大致判定目标化合物被收集在 9-11 管内，将这几管馏分合并后浓缩，进行 HPLC 检测。▲ 9-11 管馏分并管后 HPLC 检测图通过 HPLC 分离后，可以看到除了 3.882 min 的辣椒素，在 5.365 min 还有一个化合物，这是与辣椒素结构相似的二氢辣椒素。▲ 二氢辣椒素结构式中压模式下的色谱柱填料粒径通常为 30-50μm，很难将辣椒素与二氢辣椒素拆分开，因此我们需要将 C-850 切换至高压模式，利用粒径更小的高压不锈钢色谱柱分离这两个化合物。获取高纯度辣椒素：色谱条件（C-850 高压模式）色谱柱BUCHI PrepPure C18 100 &angst , 10 µ m, 250 x 20 mm平衡时间10 分钟流速15mL/min溶剂 A水溶剂 B乙腈梯度50% 等度，45 分钟紫外波长254nm 227nm 280nm检测器灵敏度高将之前获取的9-11 管馏分浓缩后，在 C-850 的高压模式下进行分离。▲ 样品粗分后 9-11 管馏分高压分离图根据之前 HPLC 的出峰顺序，我们可以推测 21-26 管馏分为辣椒素，31-33 管馏分为二氢辣椒素，取 21-26 管分别进行 HPLC 检测。▲ 高压模式下 21-26 管馏分 HPLC 检测图4结论辣椒皮中含有多种化合物，仅通过柱层析色谱或中压制备色谱很难获得高纯度的单一化合物。步琦 Pure C-850 纯化分离系统支持中压和高压双模式，一台仪器就能完成大量样品的中压粗分富集与高压高纯度纯化，分离天然产物时具有明显的优势。在本次应用中，通过中压和高压的两次分离，最终 24 与 25 管馏分的峰面积能达到 95% 以上，可以进行下一步的生物活性测试。