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请教各位老师,胰蛋白酶里的常规阴阳离子怎么前处理啊?因为我之前做的都是无机物,所以没有经验。我知道有机物有氧弹燃烧能做,但是实验室没有该设备,有老师做过相关的实验吗?
RT,两个都是阳离子交换柱,有什么区别呢,使用和维护与我平时用的常规键合相色谱柱相比,有什么特别需要值得注意的地方吗?
阳离子交换柱使用手册Chrompack HPLC IonoSpher C Columns 注意Chrompack IonoSpher C 色谱柱填充的是改性硅胶材料。向柱内导入碱性溶剂(pH6.5)或酸性溶剂(pH2.5)会溶解硅胶材料导致柱子损坏。在使用这个柱子之前,你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。 1. 简介Chrompack IonoSpher C 柱填充硅胶基质的强阳离子交换材料,含有磺酸盐功能团。特别设计用于使用常规HPLC分析有机和无机阳离子。 2. 色谱柱老化在开始分析工作以前,柱子必须经过正确的老化。一个没有正确老化的柱子可能会带来问题,诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。要老化这类柱子,首先要使用甲醇淋洗,然后使用去离子水。再用你选用的洗脱液进行平衡。 在发货以前,每根柱子都已经测试过并进行了老化。因此没有必要在第一次使用时用水冲洗)。3. 洗脱液推荐在这类柱上使用的洗脱液是要求低电导的缓冲液,例如柠檬酸或酒石酸缓冲液(或其混合溶液),pH范围从2.5到6.5,其中有乙二胺作为洗脱阳离子。 绝对不能使用水杨酸缓冲液,因为水杨酸分解产物会改变固定相的性质。 洗脱液在使用以前要脱气,并用0.5微米滤膜过滤,防止发生检测和泵送问题。 一定要在开始使用系统以前检查有否微生物生长,否则你的柱子会堵塞,柱压会升高到无法接受的水平。