仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

【求助】请问在做反相高液分离酪蛋白时 基线不平 该怎么办啊?

液相色谱(LC)

  • 大家好!帮帮忙!
    在分离酪蛋白中α-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白时,流动相:溶剂A:95%乙睛+0.1%三氟乙酸,溶剂B:100%水+0.1%三氟乙酸!采用梯度洗脱,基线跑不平,往上飘的。应该怎么办啊?
    还有样品用流动相A:B(体积比70:30)混合溶液溶解效果也不好,这样就没法定量啊!请大家指教
    +关注 私聊
  • xiaomity

    第1楼2007/11/05

    可能是梯度设置得不太好.做完一个梯度肯定能回到基线.可以用含水高一点的溶液溶解

0
    +关注 私聊
  • yjxia

    第2楼2007/11/06

    首先你的样品溶解不好肯定有影响,可以用高比例水溶液,或是纯水溶解;其次就是你每次走梯度的post time 是多长时间?一定要保证在你进下一针前,整个体系充分平衡到初始流动相(一般都要20-30min)。
    顺便问一下,你用的是什么仪器?有的仪器梯度混合装置不好,走梯度时很容易使基线发生漂移。

0
    +关注 私聊
  • 老鱼

    第3楼2007/11/06

    个人认为梯度的问题是主要的 其它的可以人为的减低

0
    +关注 私聊
  • zuofangxu

    第4楼2007/11/06

    用水溶解 试过了
    还是只能溶解一部分
    就是α-酪蛋白,自己分离出来的
    标样都可以溶解,不知道为什么

0
    +关注 私聊
  • zuofangxu

    第5楼2007/11/06

    梯度时间都在2分钟左右,有很多梯度,有一个时间在34分钟!基线老往上飘!
    用的仪器是岛津LC-20,自动进样!外梯度的梯度洗脱!

0
    +关注 私聊
  • xulinshou9742

    第6楼2007/11/06

    检测波长在210nm左右是随着乙腈的量增加基线上漂,波长设在220nm以上就不会了

0
    +关注 私聊
  • chaojishuwang

    第7楼2011/11/03

    你用的是那种柱子?

0
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...