仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

【求助】waters液相 流动相走梯度

液相色谱(LC)

  • 各位大侠,偶是新手,在做液相准备用梯度洗脱.有一个简单的问题不太清楚: waters 液相带两个高压泵,分别伸向两个流动相瓶子的小管子也有一定长度,如果我在10min内走完一个梯度的话,通过色谱柱的流动相可能还是10min前的流动相,可能梯度流动相还没有真正进入色谱柱呢. 不知道说的对不对? 如何正确的走流动相梯度,还请各位高手多多指教!
    +关注 私聊
  • nnsss

    第1楼2008/01/29

    当你准备开始运行梯度的时候一定是流动相已经运行到检测器了,换句话说就是减去了你说的那个10分钟

0
    +关注 私聊
  • gentlehorse

    第2楼2008/01/29

    系统会有一个小的延迟体积,也就是从混合器到色谱柱的体积,需要一定时间,但楼主说的太夸张了

0
    +关注 私聊
  • sunchun2008

    第3楼2008/02/02

    前两位老师的理解不对
    他是认为梯度的比例是按溶剂瓶中管子口算起的
    梯度比例是按两种溶剂混合的位置算起的,混合器是梯度比例改变的起点,梯度置后的多少,要看混合器体积/管路内腔体积的大小,行话叫死体积的大小,死体积大置后多;死体积小置后少,现代液相色谱死体积很小,一般只有几十微升,当1ml/min流速时,梯度从改变到柱头的时间也就几十秒钟。

0
0
    +关注 私聊
  • 阿du

    第5楼2008/02/02

    流动相梯度变化是从混合器开始的,当然流经柱子也要有一个过程,所以虽然显示梯度走完了,但柱子里的流动相仍然在按照梯度程序流动,所以不存在你想象的问题。你也会发现,梯度走完后需要过一段时间系统才会恢复初始状态。

0
    +关注 私聊
  • shi2004

    第6楼2008/02/14

    谢谢各位, 学习了.

0
    +关注 私聊
  • jinbaoma

    第7楼2008/10/21

    3楼和5楼说得对,你还可以根据你得到的图谱基线的走向趋势,大概可以看出你的流动相浓度变化在通过检测器检测后,实际变化和设计时间有一定的差距,就可以得出大概的相对检测滞后时间.

0
    +关注 私聊
  • nnsss

    第8楼2008/10/22

    变化点就是吸头,或者梯度混合器并不是问题的关键所在

    duliuhui 发表:流动相梯度变化是从混合器开始的,当然流经柱子也要有一个过程,所以虽然显示梯度走完了,但柱子里的流动相仍然在按照梯度程序流动,所以不存在你想象的问题。你也会发现,梯度走完后需要过一段时间系统才会恢复初始状态。

0
    +关注 私聊
  • duming

    第9楼2008/10/24

    基本不用考虑,因为系统体积最大就是几百ul反映在剃度上也就是十几秒的 延迟,另外从泵到溶剂瓶的管路体积是不参与计算的.

0
    +关注 私聊
  • juegen

    第10楼2012/08/11

    梯度比例是按两种溶剂混合的位置算起的,混合器是梯度比例改变的起点,梯度置后的多少,要看混合器体积/管路内腔体积的大小,行话叫死体积的大小,死体积大置后多;死体积小置后少,现代液相色谱死体积很小,一般只有几十微升,当1ml/min流速时,梯度从改变到柱头的时间也就几十秒钟。

0
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...