【资料】高效液相色谱故障排除完美版

以下浅谈有关六通阀进样器的使用及保养事宜(仅供参考)：

1、手柄处于Load和Inject之间时，由于暂时堵住了流路，流路中压力骤增，再转到进样位，过高的压力在柱头上引起损坏，所以应尽快转动阀，不能停留在中途。在HPLC系统中使用的注射器针头有别于气相色谱，是平头注射器。一方面，针头外侧紧贴进样器密封管内侧，密封性能好，不漏液，不引入空气；另一方面，也防止了针头刺坏密封组件及定子。

2、六通阀进样器的进样方式有部分装液法和完全装液法两种。使用部分装液法进样时，进样量最多为定量环体积的75％，如20gL的定量环最多进样15p,L的样品，并且要求每次进样体积准确、相同；使用完全装液法进样时，进样量最少为定量环体积的3至5倍，即20gL的定量环最少进样60至1001aL的样品，这样才能完全置换样品定量环内残留的溶液，达到所要求的精密度及重现性。推荐采用100ul的平头进样针配合20ul满环进样。

3、可根据进样体积的需要自已制作定量环，一般不要求精确计算定量环的体积，譬如，一根名义上10gL的定量环，实际是9gL还是1lgL并不重要，因为被测样品和校正样品的进样体积保持一致，在计算结果时误差都被抵消了。

4、进样样品要求无微粒和能阻死针头及进样阀的物质，样品溶液均要用0．45~tm的滤膜过滤。防止微粒阻塞进样阀和减少对进样阀的磨损。为防止缓冲盐和其它残留物质留在进样系统中，每次结束后应冲洗进样器，通常用不含盐的稀释剂、水或不含盐的流动相冲洗，在进样阀的Load和Inject位置反复冲洗，再用无纤维纸擦净注射器针头的外侧。

液相色谱仪色谱柱使用及维护每天用足够的时间来平衡色谱柱，您就会在处理问题方面获得最大的"补偿"，而且您的色谱柱的寿命也会变得更长！－－－－－－ 一定得做！新的色谱柱在使用之前应该在您自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且，在以后的使用中，应时常对色谱柱进行测试。

卡套柱的安装（不加预柱）

1．将卡套架套入柱芯

2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夹套

3．将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片

4．将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧

5．然后依同样的顺序连接好柱子的另一端

6．连接到液相色谱仪，PEEK接头手拧即可；若为不锈钢接头应使用专用扳手

注意：使用卡套柱时，两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗，任何时候都不能将卡套取下来，否则会造成填料的流失。

卡套柱的安装（加预柱）

1．将卡套架套入柱芯

2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使夹套高于柱芯

3．将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片

4．将"子弹头"预柱放入卡套片内

5．将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧

6．然后依同样的顺序连接好柱子的另一端

7．连接到液相色谱仪，PEEK接头手拧即可；若为不锈钢接头应使用专用扳手

更换色谱柱滤网和玻璃棉过滤片（同时可以修补色谱柱）

注意：在取出反相柱芯的滤网和玻璃片之前，应该将色谱柱充分用水和甲醇/乙腈冲洗，而且修补工具的头部也应该蘸取少量的甲醇/乙腈，以避免在取出滤网和玻璃棉滤片时带出柱子内的填料。

1．将修补工具中的2套入柱芯的顶端

2．将修补工具中的3轻轻地旋入已套着2的柱芯中，并顺时针方向旋转到旋紧

3．一手握柱芯，另一只手轻轻地向外拉3，取出柱芯顶端的滤网

4．用一个小铲子轻轻地取出滤网下面的玻璃棉以及被污染的填料

5．将新的填料用甲醇润湿，然后填入挖去的部位，压平

6．照装上新的玻璃棉滤网，并用修补工具中的4将玻璃棉压入柱芯顶端

7．柱芯顶端套上2，然后参照将滤网放入

8．压紧，然后取下2，再用4将滤网的边缘压平

平衡色谱柱 　

反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉，因此在用流动相分析样品之前，应使用10－20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱；如果您所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"。

硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡

谢谢楼主分享

楼主的经验分享不错，可为大家学习！