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【讨论】LC-20A梯度有鬼峰是怎么回事?

  • 有水有渝
    2009/09/11
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 液相仪在走甲醇-水梯度的时候,梯度变化较小时(梯度1)就没有鬼峰,较大时(梯度2),就有。自查如下:
    1、第一次发现这个问题时是一根旧色谱柱,为了对比是否是色谱柱的问题,换了一根依利特的新柱试,结果一样。所有采集过程为软件直接采集,没有扳动手动进样器。
    2、更换成阻尼管,约1米长,相同梯度下,基线末见明显鬼峰。
    3、怀疑梯度不准确,以0.05%丙酮-水溶液进行梯度精度检查,结果符合要求。
    4、接新柱,以20%甲醇、50%甲醇、80%甲醇各浓度平等后,分别20min,末见明显鬼峰。
    5、怀疑水,由于是超纯水仪制备,购进姓哈哈纯次水,结果一样,甲醇是上海星可的。
    问题是:1、如果是流动相污染,那为什么用阻尼管时没有鬼峰?
    2、如果是旧色谱柱污染,那为什么新柱也一样,就算新柱有污染,
    那走过一次梯度后,也应该把污染冲出来了,再一次采集还有。
    售后来了一次后,也还没有解决这个问题,以上梯度方法来自药典。
    梯度1

    梯度2
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  • 〓猪哥哥〓

    第1楼2009/09/11

    有没有换过仪器试试?先试下,排除由于部件或密封垫老化导致

    第二个梯度也是药典的吗?梯度变化非常快,有时梯度太快了也会出鬼峰的。梯度可以改吗?

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  • 有水有渝

    第2楼2009/09/12

    应助达人

    部件或密封垫老化导致:仪器还在保修期,平常也很注意仪器的维护,这个可能性不大,主要依据是用阻尼管走第二个梯度的时候,基线是平滑上升,没有出现鬼峰。
    第二个梯度是药典阿莫西林有关物质的,只是我用的是水,不是缓冲盐,本方法在岛津LC-2010上走没有这个问题。

    03yx2 发表:有没有换过仪器试试?先试下,排除由于部件或密封垫老化导致

    第二个梯度也是药典的吗?梯度变化非常快,有时梯度太快了也会出鬼峰的。梯度可以改吗?

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  • 〓猪哥哥〓

    第3楼2009/09/12

    仪器的问题,不可以在岛津上做?

    xky0230699 发表:部件或密封垫老化导致:仪器还在保修期,平常也很注意仪器的维护,这个可能性不大,主要依据是用阻尼管走第二个梯度的时候,基线是平滑上升,没有出现鬼峰。
    第二个梯度是药典阿莫西林有关物质的,只是我用的是水,不是缓冲盐,本方法在岛津LC-2010上走没有这个问题。

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  • 有水有渝

    第4楼2009/09/14

    应助达人

    哪位同仁手上有LC-20A高压梯度的,有空的话帮我走一下阿莫西林有关物质的空白梯度看看,看看我这是不是个案?先多谢储位板油,流动相直接乙腈-水就行了,不用配缓冲盐了。

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  • 哇咔咔

    第5楼2009/09/14

    平衡好的话有时候有缓冲盐,比没有缓冲盐的还要稳定一些。建议楼主在出鬼峰的梯度区间,再把时间拉长下,看看是否还有鬼峰。就可以确定是否梯度的问题。
    我记得LC-2010和安捷伦1200一样都是四元的体系吧。二元高压的应该比四元的梯度还要准一些。如有记错,还请见谅

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  • 柏坡

    第6楼2009/09/14

    我这里的是20A低压梯度,不知道效果会怎么样?

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  • xishumima

    第7楼2012/02/12

    您好,不知道您的问题后来是怎么解决的,我现在也使用LC-20A,出现同样的问题,梯度快结束的地方总是出现鬼峰,有的梯度出一个小杂质峰,有的梯度出一个馒头似的包,有的梯度出一堆大峰。

    有水有渝(xky0230699) 发表:哪位同仁手上有LC-20A高压梯度的,有空的话帮我走一下阿莫西林有关物质的空白梯度看看,看看我这是不是个案?先多谢储位板油,流动相直接乙腈-水就行了,不用配缓冲盐了。

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  • tangtang

    第8楼2012/02/12

    换更高纯度的水试一下?

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  • 有水有渝

    第9楼2012/02/13

    应助达人

    售后后面又来了一次,姓哈哈与屈臣氏的水都用上了,乙腈对比了国产和默克的都没有找到原因,这个基本是不了了之了,虽然现在检测还有用到这个条件。

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  • xishumima

    第10楼2012/02/13

    很感谢您的回复,我们这边的仪器也是来过两次售后了,跟您的情况一样,也是将试剂进行了对比,并排除了进样器污染,都没有找到原因。

    看到您说最后是不了了之,很是担忧。

    既然您在LC-2010上可以做出好的空白,难道不可以说明LC-20A仪器有故障吗?

    有水有渝(xky0230699) 发表:售后后面又来了一次,姓哈哈与屈臣氏的水都用上了,乙腈对比了国产和默克的都没有找到原因,这个基本是不了了之了,虽然现在检测还有用到这个条件。

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