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【求助】关于液相色谱法测定β-胡萝卜素的流动相的问题

液相色谱(LC)

  • 我用国标《GB/T 5009.83-2003 食品中胡萝卜素的测定》中液相色谱法测β-胡萝卜素,但出峰时间太长了,我试着加大了乙腈对甲醇的比例,不过效果不是很理想,看了一些参考文献,但好多都没告诉我出峰时间,我也不想一个一个的试了,所以请问哪位大侠有出峰时间短的流动相配方阿?帮偶一把吧!
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  • 阿du

    第1楼2008/02/19

    按照国标应该比较好吧。
    不知道你用什么柱子,流动相是什么?要缩短目标物质的保留时间,可以提高流速(注意压力不要过高),或者根据流动相组分的不同极性适当改变,如果是反相色谱增大强极性组分就可以了。或者你用梯度洗脱来加快分析速度。

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  • abcde

    第2楼2008/02/19

    流动相与色谱柱有关, 你要注意样品中会有a-胡萝卜素,与β-胡萝卜素很难分离

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  • Easy-Boy

    第3楼2008/02/20

    一般情况下,加大乙腈比例会使得出峰时间缩短。

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  • Ty

    第4楼2008/02/20

    我已经把乙腈和甲醇的比例调成1:1了,可出峰的时间依然是50min多,之前我把乙腈和甲醇的比例调成2:8的时候,也是50min左右出峰

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  • Ty

    第5楼2008/02/20

    今天我把乙腈和甲醇的比例都调到了9:1,流速是1.8ml/min,出峰时间也没有变短,问题究竟出在哪里呢?

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  • 色色猪

    第6楼2008/02/20

    b-胡萝卜素我也做过,流动相:乙腈+甲醇=1+1,柱子:安捷伦碳18柱,150mm,流速2.0mL/min,标准出峰时间大概是18~20分钟,如果你想加快出峰时间,可以试着把柱温箱的温度调高。你的出峰时间那么长,用的是250的柱子吧,换根短的试下

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  • Ty

    第7楼2008/02/20

    谢谢楼上的大哥!
    我的柱子是KR100-5C18,的确是250mm的,可我目前没有可替换的柱子……
    而且液相色谱仪也没有柱温箱……

    令人郁闷阿!

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  • bessy

    第8楼2008/02/23



    β-胡萝卜素出峰时间是22分,也是用250mm柱.

    下面这篇文章里有具体的操作方法, 你可以看一下。对你一定很有帮助。
    Development and evaluation of an HPLC method for the analysis of carotenoids in foods, and the measurement of the caroteniod content of vegetables and fruits commonly consumed in the UK -------Food Chemistry 54(1995) 101-111

    tianyu19850402 发表:我用国标《GB/T 5009.83-2003 食品中胡萝卜素的测定》中液相色谱法测β-胡萝卜素,但出峰时间太长了,我试着加大了乙腈对甲醇的比例,不过效果不是很理想,看了一些参考文献,但好多都没告诉我出峰时间,我也不想一个一个的试了,所以请问哪位大侠有出峰时间短的流动相配方阿?帮偶一把吧!

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  • amwtgsc

    第9楼2008/03/04

    如此,不太合乎常理,可能柱子有问题。请试换色谱柱。

    tianyu19850402 发表:我已经把乙腈和甲醇的比例调成1:1了,可出峰的时间依然是50min多,之前我把乙腈和甲醇的比例调成2:8的时候,也是50min左右出峰

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  • Ty

    第10楼2008/04/21

    我换柱子了,250mm的,但还是不行
    不过我把流动相换成100%甲醇的时候,出峰时间倒是提前了,37min左右
    之前用纯乙腈,反而要跑50min ,感觉好奇怪呀
    难道不是极性小些的流动相更好吗?

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