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【求助】缓冲溶液在HPLC分析中的主要作用是什么？

tbhc

2008/02/21

液相色谱（LC）

查了一些资料，缓冲溶液的主要作用是保持溶液的PH值的稳定，刚才和一个同事交流的时候，他讲缓冲溶液主要是抑制一些分子在做HPLC时的电离。现在有几个个问题：

（1）HPLC分析中，缓冲溶液的主要作用是什么？
（2）HPLC分析中常用的缓冲溶液为哪些？
（3）刚看Waters的一个课件时，看到下面的表述，有处不明白：为什么磷酸有三个pK值？

Waters资料：

磷酸拥有三个pKa: pK1=2.15, pK2=7.2, pK3=12.3
磷酸缓冲盐系统具有超低的紫外吸收, 对从事非LC/MS分析的科学家具有很大吸引力
持续有科学家寻求在以上三个pH范围均可稳定使用的分离柱
“如果你能提供具有以上能力的色谱柱, 我肯定会购买它!”–从许多色谱学者得到的反馈
􀂃 X-Bridge 系列柱是目前唯一提供这一可能的色谱柱!

盼指教，多谢了，本人刚开始学习HPLC，很多地方不明白，呵呵

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Easy-Boy

第1楼2008/02/21

磷酸含有三个氢离子，因此有三个pK。缓冲液的主要作用是用来调节流动相的PH值稳定。
tbhc 发表:查了一些资料，缓冲溶液的主要作用是保持溶液的PH值的稳定，刚才和一个同事交流的时候，他讲缓冲溶液主要是抑制一些分子在做HPLC时的电离。现在有几个个问题：

（1）HPLC分析中，缓冲溶液的主要作用是什么？
（2）HPLC分析中常用的缓冲溶液为哪些？
（3）刚看Waters的一个课件时，看到下面的表述，有处不明白：为什么磷酸有三个pK值？

Waters资料：

磷酸拥有三个pKa: pK1=2.15, pK2=7.2, pK3=12.3
磷酸缓冲盐系统具有超低的紫外吸收, 对从事非LC/MS分析的科学家具有很大吸引力
持续有科学家寻求在以上三个pH范围均可稳定使用的分离柱
“如果你能提供具有以上能力的色谱柱, 我肯定会购买它!”–从许多色谱学者得到的反馈
􀂃 X-Bridge 系列柱是目前唯一提供这一可能的色谱柱!

盼指教，多谢了，本人刚开始学习HPLC，很多地方不明白，呵呵

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阿du

第2楼2008/02/21

同意二楼的说法。
缓冲盐主要是调整移动相PH值的，PH值对样品的分离又很大的影响。
一般都用弱酸/弱酸盐或弱酸来调节PH在某一特定值。常用磷酸/磷酸盐或醋酸/醋酸盐等缓冲体系。磷酸因有3个氢，所以释放出3个质子分别由3个pk值.

0

草根

第3楼2008/02/22

也有其它的，甲酸、氨水、二乙醇胺、三乙醇胺等，主要看你检测组份的性质。

0

zxchinatop

第4楼2008/02/22

原来如此！受益匪浅~

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vicou_chen

第5楼2008/03/16

缓冲溶液的主要作用调节pH值的,当往缓冲体系中加入少量酸或碱或对其适当稀释时,pH值不会改变太大,从而保持pH值的恒定.比如在甲醇或乙腈中混和一定量的磷酸盐缓冲液,因为甲醇带有酸性,而乙腈带有碱性,使用了磷酸盐缓冲液而不是固定的酸或碱,可以使pH值恒定在一个水平.

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wangqi_qqi

第6楼2015/05/18

谢谢！收益！

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一片枫叶

第7楼2015/05/18

应助达人

磷酸盐具有三级电离，所用有三个PK值，对于溶液的PH值具有很好的缓冲作用。

0

qaz15000

第8楼2015/05/20

都没有说到点子上

0

hujiangtao

第9楼2015/05/21

应助达人

调节待测物性质有利于保留和洗脱

0

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