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【求助】求助:新色谱柱出现鬼峰,如何处理?

液相色谱(LC)

  • 本人是液相色谱新手,要用液相分离两种药物,色谱柱为反相C18柱,4.6×250 mm。
    先用甲醇水(70-30)、甲醇(100 %)老化过夜后再使用。
    流动相A:甲醇-水-醋酸-三乙胺(20-75-5-0.1,v/V/v/v,PH 2.4)
    流动相B:甲醇
    色谱条件0-20 min,A由100 %降为0,B升为100 %,保持10 min,波长254 nm
    一开始平衡色谱柱时,基线还是平的,可是用100 %甲醇进样5 ul后,出现十几个鬼峰。之后又用甲醇冲柱过夜后,流动相换成甲醇水体系,还是有十几个鬼峰;
    换另一根色谱柱(之前也走过醋酸、三乙胺缓冲溶液),同样出现十几个鬼峰,
    请问是什么原因造成的?

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  • facehu

    第1楼2008/03/17

    我做样的时候也会出现这种情况,我这边是脱气机坏了,还有一个和样品有关,你跑个等度看还有没有鬼峰

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  • 雪妖

    第2楼2008/03/17

    你的A,B流动相里都有甲醇,我觉得你是不是换一下流动相,你的鬼峰有可能是盐一类的,你用10%的甲醇0.2ml/min冲柱过夜,明天再看看,每次做完以后我建议用10%的甲醇冲上30分钟以后再换高浓度的有机相冲柱保存,我以前做的时候一般一天做完以后第二天还做相同的东西,就用使用的流动相低流速过夜,第二天来几分钟就平衡好了,这样节约时间嘛,一晚上也用不了多少流动相的,我做药比较多,可以交流交流.

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  • xiaotrn

    第3楼2008/03/18

    谢谢两位同道的回复。
    把流动相换成纯水和甲醇,把柱子平衡过夜后,鬼峰小了很多,但基线不平,跟1楼一样。

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  • nnsss

    第4楼2008/03/18

    考虑试剂的问题,另外考虑梯度合理性的问题

    xiaotrn 发表:谢谢两位同道的回复。
    把流动相换成纯水和甲醇,把柱子平衡过夜后,鬼峰小了很多,但基线不平,跟1楼一样。

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  • lvjian21

    第5楼2008/03/18

    1.清洗进样口
    2.重新配制流动相
    3.重新配制样品溶液

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  • catcat21_6

    第7楼2009/07/14

    应该检查下鬼峰出现的原因,是进样阀?检测器?还是系统?还是色谱柱?

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  • sando

    第8楼2009/07/15

    SCIEX工程师

    岛津的仪器。
    若是标准都走成这么丑,不是标准脏就是仪器脏。

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