savedown
第2楼2008/05/23
做一全谱扫描,看看是否有最大吸收,如果有,就以此最大吸收为准。
如果没有,我估计你得到的是从紫外到近红外下降的一条坡线,那么可以参照色值测定的方法,例如蔗糖的410nm和650nm的两处定义为色值表征波长;也有较多的文献选取520nm的。
如果要表达颜色感官刺激值,可以把全谱响应换算成CIE的L*a*b或XYZ值。
savedown
第3楼2008/05/23
1、物质不一样,出峰位置也不一样,很正常。
2、都会吸收,只是吸收的位置不一样,没有可见吸收的,看起来就是透明的。
如果要表征此类体系,建议选择下降趋势一样的波长位置来加以表征。
初学者&九点虎
第4楼2008/05/23
棕黄色透明溶液(主要含本草提取物、糖),用分光光度计测量其吸光度,其吸光度大小与溶液颜色的深浅是否呈正比例关系?用吸光度来控制溶液颜色是否科学?(其实俺也知道肯定不合适)
如果单纯从控制溶液颜色的角度出发,应该采用哪些仪器测量更为合理、科学?用测色仪行不行?
请高人解答,不胜感谢!
就这个问题,我也仔细的考虑过,一般情况下,溶液有肉眼可见的颜色,说明在可见光区有吸收.在此可以做一个波长扫描,波长范围360-800纳米就可以,光谱带宽0.2,采样间隔0.5,扫描速度中速(说明:因为俺用的是岛津的UV-2550,可能在软件操作上和别的仪器稍微有点差别,希望别误导大家)扫描完毕后,采用峰值检测功能,找到最大吸收.如果峰型出现平头峰的话,可以采用偶数阶的导数来找出最大吸收,一般用二阶导数光谱图就可以找到最大吸收.
如果是单一组分,就可以在最大吸收波长处进行样品测定了;如果是混合组分,而只想控制其颜色,则我个人认为在最大吸收波长处测定会出现比较大的误差.
俺的建议是:例如肉眼可见溶液为黄色,可以在黄光的波长范围内进行积分,俺也没记住黄光的波长范围,要做的话可以查一下相关资料,以积分出来的面积做为你溶液的颜色的一个判定.可以配置一个标准溶液,对其在此波长范围内的积分设为1,其他的与其进行比较,大于1说明颜色深,反之毅然.或相对比较两个溶液的积分值,大的说明颜色深,这也是一个相对控制的手段.
在入射光波长一定的条件下,吸光度与溶液的浓度和液层的厚度有关,因液层厚度也是一定的(一般都用1cm比色皿),所以,吸光度只和溶液的浓度有关了,因此,产生以下两个疑问:
1、溶液的颜色对吸光度的测量有无影响?当然一般浓度高的溶液色泽也深,但我们的溶液浓度基本一致,但吸光度却有0.4之差?这是为何?
溶液的颜色与测量有关系的,一般溶液表现出来的颜色,其最大吸收就在此颜色范围内;颜色不是一个测定波长所表现出来了,而是一个波长范围内溶液表现出来的.举个例子,如果溶液颜色为黄色,而测定波长在黄光的波长单位内,那就有关系了;如果溶液颜色为黄色,而要在紫外区测定,那关系就不是很大了,不能说完全没有关系,因为没准此物质在紫外区也有吸收.
溶液浓度基本一致,但吸光度却有0.4之差,俺个人认为你没有在最大吸收波长处测定造成的,您做波长扫描了吗?你测定波长是多少???
2、是否溶液中所有的成分都会吸收入射光?因每种物质的最大吸收峰不一样,此影响对最终结果的影响有多大?
物质不同,对光的吸收也不同,如果所测组分在某一波长有吸收,而别的组分也在此波长处有吸收,则会干扰测定,(具体请参看俺关于干扰的帖子),测定结果偏高.如果干扰组分在此波长处吸收很小,可以忽略,但要不是很小,则要考虑.这个问题建议您先做个纯的标准样品,再做做加标回收率,看看回收率水平怎么样,这在相当程度上可以看出有没有别的组分在干扰目标组分.