【求助】我是HPLC新手:如果 UV 波长相近,HPLC 是否会出现峰的重叠?

说到分离的话我觉得不是和紫外吸收有关的吧，如果用反相HPLC的话应该是极性大的物质先洗脱出来吧，如果要分离的话，最好是调节流动相中有机相的比例，不是UV吸收决定的。UV波长相同，说明有可能他们有共同的发色基团，或者说相似的基团。

换言之,我是可以在柱子里跑跑试试了,是吗?

你想分离最好他们的UV吸收能靠的很近，不然没法分离。假如你一个物质在218有吸收，另一个没有吸收。那么，你走液相的时候，就只出来一个峰，不吸收的不出峰，就没办法知道它含量了。

能上液相的，主要选择柱子和调节流动相中有机溶剂的比例达到分离的效果。

好像不是很好弄，可以考虑一下，重新选择流动相

分离和吸收是两回事,你先做了再说

楼主果然是新手，我觉得最好先看看液谱的分离原理。

这要看两种物质在相同的色谱条件下保留时间是否相同或相近,保留时间相同或相近的两个峰会重叠成一个峰或是两个分离度不够的峰.识别峰是否重叠,则利用不同的吸收波长来判别

谢谢大家的回复,因为是第一次用HPLC已经是好些年前的事情了,所以很迷茫.负责仪器维护的人说是怕果胶会堵柱子,我今天想想先把果胶break down以后,再试试.

和波长关系不大吧，和峰的分离效果关系更大些！