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气相色谱(GC)
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[转贴]撿量線(2)
hontim
2005/03/01
私聊
气相色谱(GC)
5.檢量線中"截距"的意義是甚麼?
檢量線的每一個濃度經過儀器的分析後,都會產生一個相對應的訊號,假如我們忽視偵測極限的存在,從高到低一直到濃度為零的時候, 這條線應該是要經過座標的原點(0,0),在實際的狀況下卻絕少發生, 為甚麼會這樣? 因為還有儀器的噪音! 在重複製作檢量線時, 可以觀察到截距是會有變化的,在這個時候,除了儀器的噪音外,還要加上人為的操作誤差及不穩定度. 所以一位從事定量分析的新進人員, 初步的考驗就是令其重複製作檢量線, 由截距及斜率的變化, 可以很容易判斷出來該分析員一些基本操作, 例如標準品的稀釋是否熟練...........
現在既然我們知道了截距所代表的意義,那麼截距與定量濃度之間又有甚麼樣的關係?? "假設"我們的人為操作的誤差為零,或經由多次的分析製作檢量線,所得到的平均"截距"事實上應該就可以代表儀器本身在分析時候所產生的噪音, 這種噪音的量化方式,可以取代人為主觀意識的測量, 例如製作噪訊比值(S/N ratio).在決定了噪音值的大小後,以S/N=3為例,最快的方法是直接在撿量線的Y軸上量取3a(a代表截距)的高度,此點訊號值的對應,即為分析物產生S/N=3所需之濃度. 另外,分析員可以藉由不同濃度的標準品注射,由分析物所產生的訊號(波峰面積或高度)與截距的比值,也可以直接得到產生S/N=3所需之濃度. 許多教科書上的說法都是由眼睛觀察出來, 並無數據上的支持,甲看是1:3, 由乙來看說不定變成1:4 ! 尤其是氣相層析,低溫及高溫區域所得到的噪音是完全不一樣的.......
另外,如果你的眼睛夠尖銳,會發現某些檢量線的低濃度部分會位於Y軸3a下方, 這些部分的直線雖能符合品管規定(如r=0.995),但定量結果一般都還是不予採用的!! 所以前面強調過,調整分析物濃度盡量不要讓 它們的訊號值落在撿量線的低濃度部分....
有空閒的話,可以試試看另外一種"變形"的檢量線: 配製至少五個濃度高於IDL的一系列標準品, 每個濃度注射分析七次,求每一濃度產生訊號的標準偏差, 所得的七個值點在以濃度為X軸,訊號值為Y軸的座標上,並線性迴歸得一直線,此直線的截距假設為a,3a就是你這個分析之LOD, 10a就是LOQ!! 這也是眾多LOQ, LOD的製作方法中的一種.
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