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【每周讨论6】你使用缓冲溶液吗?使用缓冲溶液应注意哪些方面?

液相色谱(LC)

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  • 缓冲溶液经常作为流动相使用,其为系统提供了稳定的PH范围,改善了分离和峰形。
    那么,在使用缓冲溶液作流动相时,应注意哪些方面?
    作为本期讨论话题,大家可从配制、使用、清洗、维护、色谱柱、泵等各个方面说下自己的观点。

    小结:

    1、配制时注意调节PH值。
    2、使用前注意过滤和脱气。
    3、流动相切换时注意含有少量有机相的水充分置换、过渡,不可直接用有机相替换,防止盐析出。
    4、做好不要让含有缓冲盐的流动相在系统或色谱柱中过夜,使用后应置换成有机相。
    5、泵头用纯水清洗干净;进样阀也需清洗。
    6、配好的缓冲盐溶液不要长时间使用,最好2--3天重新更换(易滋生微生物)。
    7、磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉,应临用现制。
    8、容器应定期清洗,以除去底部的杂质沉淀和可能生长的微生物。
    9、应选择具有与流动相的pH相近的pKa 的缓冲液(浓度稀也具有较强能力的缓冲液)
    10、 即使确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收(在波长210nm附近进行检测时,不能用醋酸和柠檬酸的缓冲液)

活到九十 学到一百 2008/06/25

[quote]原文由 [B]duliuhui[/B] 发表: 缓冲溶液经常作为流动相使用,其为系统提供了稳定的PH范围,改善了分离和峰形。 那么,在使用缓冲溶液作流动相时,应注意哪些方面? 作为本期讨论话题,大家可从配制、使用、清洗、维护、色谱柱、泵等各个方面说下自己的观点。[/quote] 配制时应注意调节PH值,用前注意过滤和脱气;使用时注意不能和其它有机溶剂直接混合,应以水作过渡;使用后先用含有少量有机相的水充分置换;泵头用纯水冲洗干净;做好不要让含有缓冲盐的流动相在系统或色谱柱中过夜;配好的缓冲盐溶液不要长时间使用,最好2--3天重新更换。

我的8090 2008/06/25

[quote]原文由 [B]yd88886666[/B] 发表: 最好再加少量的叠氮钠[/quote] 多了易影响峰型哈

hrcren 2008/08/10

1、配制:0.45um滤膜过滤除去不溶杂质; 2、脱气:超声或脱气机脱气,避免空气进入色谱柱和检测器; 3、冲洗:使用完缓冲液后,要冲洗干净,不能有残留,否则会损坏高压泵及密封垫圈。 4、防漏:管路的其他部分也要严格密封,不能有漏点,否则漏出的缓冲液会析出无机盐,使管路部件的密封性越变越差。 暂时想到的只有这些。[em0814] [em0814] [em0814]

yzlbq 2008/06/25

关于缓冲溶液的配制要赶除二氧化碳所以要将水溶液加热煮沸,在静置过程中遇到问题:一:如果时夏秋时节放在室温下冷却需要最少1.5小时即使放水冷却也需要1小时左右而且还要经常换水,结果还是不是想要的水,二:这种方法处理二氧化碳水费时费事有没有新方法。 希望能有高手指教!

jumpingli 2008/06/25

缓冲溶液我们在配制的时候都用专用容器,超纯水,通过0.45微米滤膜过滤,在使用的前一天配制,夏季要经常更换,容易滋生细菌藻类等

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  • 活到九十 学到一百

    第1楼2008/06/25

    配制时应注意调节PH值,用前注意过滤和脱气;使用时注意不能和其它有机溶剂直接混合,应以水作过渡;使用后先用含有少量有机相的水充分置换;泵头用纯水冲洗干净;做好不要让含有缓冲盐的流动相在系统或色谱柱中过夜;配好的缓冲盐溶液不要长时间使用,最好2--3天重新更换。

    duliuhui 发表:缓冲溶液经常作为流动相使用,其为系统提供了稳定的PH范围,改善了分离和峰形。
    那么,在使用缓冲溶液作流动相时,应注意哪些方面?
    作为本期讨论话题,大家可从配制、使用、清洗、维护、色谱柱、泵等各个方面说下自己的观点。

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  • 天空之城

    第2楼2008/06/25

    1、配制前注意pH的调节,混合均匀后冷却至室温再超声;
    2、使用的话,我一般用的都是不含盐的,所以只要在开泵前赶走管子中的气泡就好;
    3、清洗:我们是先用纯水冲洗半个小时,再用甲醇冲洗;
    4、一般的缓冲溶液如果用不频繁的话,下次用之前最好重新配制,由于是缓冲溶液,里面很有可能滋生微生物,对柱子不好,也对结果有所影响

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  • yzlbq

    第3楼2008/06/25

    关于缓冲溶液的配制要赶除二氧化碳所以要将水溶液加热煮沸,在静置过程中遇到问题:一:如果时夏秋时节放在室温下冷却需要最少1.5小时即使放水冷却也需要1小时左右而且还要经常换水,结果还是不是想要的水,二:这种方法处理二氧化碳水费时费事有没有新方法。
    希望能有高手指教!

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  • wjm7578

    第4楼2008/06/25

    1、配制时如果用磷酸调pH一定要慢慢慢。

    2、使用时,管路最好先用纯水替换后再平衡色谱柱。

    3、冬天使用一定要保证实验室的温度,防止盐析出。

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  • 麦 兜

    第5楼2008/06/25

    路过,顺便学习一下!!

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  • It is me!

    第6楼2008/06/25

    缓冲液使用分析纯的试剂,配置后调节pH,再过滤再脱气,每天更换。比较注意的是停机之前要冲去系统里存在的缓冲液,主要是考虑到其中的盐分影响。要是短时间就无所谓了。

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  • alex1975

    第7楼2008/06/25

    pH值的测定要精确,较长时间不用,过一下滤膜也能用的

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  • 面对面想你

    第8楼2008/06/25

    写得很好噢,顺便弱弱地问下,PH调节为什么要超声呢?

    110003 发表:1、配制前注意pH的调节,混合均匀后冷却至室温再超声;
    2、使用的话,我一般用的都是不含盐的,所以只要在开泵前赶走管子中的气泡就好;
    3、清洗:我们是先用纯水冲洗半个小时,再用甲醇冲洗;
    4、一般的缓冲溶液如果用不频繁的话,下次用之前最好重新配制,由于是缓冲溶液,里面很有可能滋生微生物,对柱子不好,也对结果有所影响

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  • 阿du

    第9楼2008/06/25

    作为移动相,是需要脱气处理的。

    jackcong 发表:写得很好噢,顺便弱弱地问下,PH调节为什么要超声呢?

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  • jumpingli

    第10楼2008/06/25

    缓冲溶液我们在配制的时候都用专用容器,超纯水,通过0.45微米滤膜过滤,在使用的前一天配制,夏季要经常更换,容易滋生细菌藻类等

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