【求助】外标法，DAD检测器选择5个波长同时检测，为什么分别计算5个波长下的定量结果会不一致？

不清楚哦

不一致,偏差有多少?
5个数据可以看下RSD了!

也许样品中含有在不同波长下有不同吸收的物质,而标准品中恰好没有该种物质

不是最大吸收波长定量不太准的吧。

可能是我没说清楚。具体情况是这样的：
我配制了一个标样0.41718mg/l，试样0.41160mg/l，各进二针。因为是DAD检测器，最多可同时检测5个波长。我选了3个波长做，其中225nm是物质的最强吸收波长，285nm是物质的次波长。
    225nm    260nm    285nm
标样峰面积1    36370.4    11106.3    6508.7
标样峰面积1    36441.5    11100.4    6483.1
标样峰面积平均    36405.96    11103.2    6495.9
试样峰面积1    36157.4    11099.9    6549.5
试样峰面积1    36216.9    11117.8    6553.1
试样峰面积平均    36187.15    11108.85    6551.3

我觉得标样、试样各二针间的精密度都没问题，另外做了加标回收，也没问题。

但按照225nm得到的数据算，试样纯度为99.34％；
按照260nm得到的数据算，试样纯度为99.99％；
按照285nm得到的数据算，试样纯度为98.97％。
（标样纯度为98.5％）

1、    为什么按不同波长算，最后纯度差这么多？
2、    285nm是次波长，为什么它的峰面积要比260nm的还要少？

也许样品中含有在不同波长下有不同吸收的物质,而标准品中恰好没有该种物质

也许样品中含有在不同波长下有不同吸收的物质,而标准品中恰好没有该种物质
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存在这种可能性。问题是怎样证明样品主峰中是否真得混了其它物质？我之前用四根不同的液相色谱柱分离过，都没有在主峰边上发现其它的杂质。纯度因子在990.0上以上。加标回收率在98％左右。再问一下，加标回收率在多少范围内是可以接受的？

每一个物质都会有一个最佳波段来测试的吧！所以我认为在不同的波长下定量结果不一致属于正常的现象。

应助达人

纯度这么高，本身你的加标回收就是98%，外标合适么？