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【求助】峰前沿得厉害,为什么

液相色谱(LC)

  • 请教一下大家,这2天色谱出现了很奇怪的问题:
    完全按照以前的色谱条件,但是走出来的峰前沿得很厉害。现在换用了2台不同的仪器,2根不同的柱子,2批不同的样品,做出来的结果都是一样的,希望大家给我看看我的问题出在哪里?
    实验方法:流动相A:水
    B:乙腈
    流速:0.4ml/min
    波长:298nm
    柱子:Zorbax c18,4.6*150mm,5um,

    样品为一种酸,我是液相和质谱一起做的,在柱后我加了碱的,所以在流动相中我只用了乙腈和水,样品在基本上50%时出来,现在已经排除是由于样品过载的原因,样品是用初始流动相来溶解的.
    以前按照这个方法做出来的对称性蛮好的。
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  • dereky

    第1楼2008/07/15

    你的流动相是和以前一样吗?你再确认一下!你已经排除了仪器、柱子的问题,那你就应该确认一下流动相。请继续跟帖,我也很想了解是怎么回事!谢谢

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  • cctv2008

    第2楼2008/07/15

    你的样品PH值是多少?PH值得大小对柱子、柱效和出峰都有很大影响。一般C18柱的适应PH值在2~8之间,超过这个范围,对柱效影响非常大

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  • nnsss

    第3楼2008/07/15

    流速偏小,另外考虑柱温的干扰,

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  • susan6018

    第4楼2008/07/15

    流动相没有变,另外我流动相中只有乙腈和水,PH应该在2-8范围内。

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  • cctv2008

    第5楼2008/07/15

    样品溶液的PH值????

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  • 北方海盗

    第6楼2008/07/15

    个人认为还是色谱柱的原因,建议把色谱柱反过来使用一下看看!

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  • yangqiong-gz

    第7楼2008/07/15

    这个问题出在流动相和样品之间的PH差异,当流动相的PH值与样品制成后的PH有差异时多数会出现这种情况,要达到很好的分析效果,最好样品配置时使用流动相进行配置好点。

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  • susan6018

    第8楼2008/07/15

    我就是采用的初始流动相来配样的

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  • 司马

    第9楼2008/07/15

    听了你的描述
    感觉柱子被污染或柱效下降的可能性比较大

    如果有保护柱要留意有没有失效

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  • 制备液相

    第10楼2008/07/15

    你的进样量多少?
    20ul?
    你用下10ul,或者5ul看看.
    从我的经验来看,问题可以解决的.

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