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【分享】海德利森色谱装柱流程
cht0310751
2008/08/22
私聊
液相色谱(LC)
海德利森色谱装柱流程
以填装5um 硅胶 4.6×250 分析柱为例
1 连接装柱所需空压机和海德利森色谱装柱机 确保装柱机工作时机身稳固
2 称取填料3.0-3.5g (4.6×250 分析柱标准需要2.8g,经验3.2g比较合适)
3 用40-50ml异丙醇(或异丙醇与乙腈比例1:1)溶解填料 用玻璃棒搅拌均匀 后用超声波超3分钟 以确保其分散性
4 迅速将上述混合液倒入匀浆罐(尽量短时间内完成该工序并确保匀浆罐内无气泡) 如匀浆罐不满再用异丙醇(或异丙醇与乙腈比例1:1)补满 理想情况是不需要再补充异丙醇(或异丙醇与乙腈比例1:1)
熟练后可知需要多少原料 所需原料的梁与温度、填料溶解性有关
5 迅速将匀浆罐和柱子连接到泵上 以60MPA的压力 以甲醇(化学纯)做流动相开启装柱机 保持装柱机在60MPA压力下工作20分钟
6 减压至30MPA 运行5-10分钟 缓慢降压至系统无压力 静止3分钟
7 卸下柱子 看柱头部分是否平整 如不平整用美工刀铲平(很需要技术的步骤)
8 将柱子接入高效
液相色谱仪
用甲醇(色谱级)以1.0流速运行30分钟
9 开始检验色谱柱效
10 多次熟练此工作 以提高装柱质量
备注:
1异丙醇(或异丙醇与乙腈比例1:1)至少分析纯
2甲醇 为控制成本可用化学纯 但事先需要经过0.2um 有机滤膜过滤
3工作开始前开启装柱机用流动相甲醇冲洗管路 尽量确保管路中无气泡
北京海德利森科技有限公司.
陈海涛 工程师
13911876986 cht01310751@163.com
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