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【求助】请大家帮我分析分析，该怎样才能有效分离这些物质？

chainxk

2008/10/03

液相色谱（LC）

大家好！我做的是Vc发酵废水中发色物质的分析鉴定。该发酵废水已经过厌氧＋好氧生物处理，但有颜色，且为真色。我采用截留分子量为3000的超滤膜，将该水样分成截留液和渗透液，对截留液进行分析（截留液中含有主要发色物质，分子量3000以上）。通过其他检测手段，已知该发色物质主要含有羰基（发色基团）、氨基、羧基（与水样中大量钠离子和钙离子形成了羧酸盐），水溶性很好，不含长碳氢链和苯环，因此应该是聚合物。采用安捷伦1200，sphereclone ODS（2）C18柱，甲醇：水＝60：40（已试过各种比例，该比例最好），260nm波长，得到两个峰，且峰形较好。然后采用这个条件上液质，但液质结果显示有十几种物质，说明该截留液中物质成分仍较多（但以发色物质为主），该液相条件没能有效分离水样中的物质。我认为主要发色物质可能有几种，其结构单元是相似的，很可能是聚合数不同（因为在生物处理过程中被打碎成不同聚合数或者重新聚合）。另外还有些浓度很低的杂质，结构未知，其最大吸收不在260nm处。
现在的问题是：我该如何将发色物质有效分开，该换用什么流动相？用乙腈吗？
衷心感谢大家能够耐心看完！请大家提出宝贵意见和建议！

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Easy-Boy

第1楼2008/10/04

如果是一系列的不同聚合度的物质，很难用一个条件分离。而且质谱和光谱不一样，能够检出更多物质很正常。改用梯度洗脱吧

0

chainxk

第2楼2008/10/04

感谢你的宝贵意见！
我对于液相色谱只是略懂皮毛，希望以后能继续不吝指教！

0

有水有渝

第3楼2008/10/04

应助达人

最好先做一次波长扫描看看，在什么位置有最大吸收，在各最大吸收波长处都做一个看看是不是同一个物质产生的。

0

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