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【求助】两年多没用的制备柱如何冲洗?

  • 开心一下
    2008/11/20
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 新接手的一台Gilson的分析兼制备型的高效液相色谱,因为仪器很少有用,配的制备柱已经有两年多没有用过。但最近有课题组想用,可是我怕柱子里面已经干掉,会有断层,不知道大量溶剂冲洗能否恢复柱效?如果冲洗的话,用什么比例的溶剂冲洗效果会好一些呢?请各位大侠支支招,谢谢啦~~
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  • happy水中月

    第1楼2008/11/20

    平衡色谱柱
    反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存
    或运输过程中可能会干掉,因此在用流动相分析样品之前,应使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱;如果您所
    使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"。
      硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相,请在使用流动相
    之前用乙醇或异丙醇平衡
    如何平衡色谱柱?

    平衡过程中,将流速缓慢地提高


    用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂度如果较低,则需要较长的时间来平衡)





    极性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色谱填料)的再生:
    正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**


    非极性固定相(如反相色谱填料RP-18,RP-8,CN等)的再生:


    水→乙腈→氯仿(或异丙醇)→乙腈→水


    0.05M稀硫酸可以用来清洗已污染的色谱柱

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  • It is me!

    第2楼2008/11/20

    很是佩服1楼的说得很详细.

    我建议冲洗后,用检测柱子的物质再检测几次.

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  • 制备液相

    第3楼2008/11/21

    用小流速的甲醇长时间冲洗,由于时间太久,柱头不排除已经风干塌陷的可能性。记住流速一定要小,1ml/min就可以,过夜,充分浸润饱和。
    然后用萘,进行柱效测试。

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