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【求助】有做过柱后衍生化实验的大虾们,帮帮忙吧.

  • wang810611
    2009/02/05
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 我现在正在做一个项目,需要采用柱后衍生化的方法,用荧光检测器进行有关物质及含量的分析,可出图总是不稳定,保留时间及峰面积都差挺多,怎么回事啊?我都快急死了,请大家帮帮我吧.介绍一些经验给我.在此谢过了.
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  • ygx

    第1楼2009/02/05

    我做过柱后衍生化的,不过是紫外检测器。
    柱后衍生化首先要选择一个合适的着色剂,还要有一个合适的反应浓度:既要适当过量,又要保证试样目标物反应完全,还不浪费试剂;另外反应温度要合适;反应所需的pH值环境要适合;衍生液的流速与流动相流速配比要合适,一般两者流速相同。
    仪器方面:需要两个高压泵(一个打流动相,一个打衍生液)、一个控温精度高的衍生化反应器(其内部的的反应盘管长度要合适,要确保使反应完全)。试样经色谱柱流出后,在与衍生液柱后混合时,还需要一个能够保证两者混合均匀的混合器(混合三通)。
    你说的保留时间和峰面积重现性差别大,究其原因,可能是:1.流动相或衍生液流速不稳;2.进行衍生化反应的温度波动大,不稳;3.柱后混合器质量不高,造成混合不均,引起峰面积变化大;4.选择的衍生剂不合适或浓度不合适。

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  • 老多_小多

    第2楼2009/02/06

    1楼说的很详细
    你的柱后衍生化是买了哪的,流速稳定吗?

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  • amwuem

    第3楼2009/02/06

    你是那的,我司有柱后衍生装置,如需请联系dreamsgood@163.com 13632374563黄生

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