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OPA与氨基酸反应是否有颜色出现?

singli

2006/05/22

液相色谱（LC）

我刚买回来一瓶邻苯二甲醛(OPA)，与氨基酸反应后没有颜色出现，不知是否正确？请各位朋友帮帮忙啊！
具体的衍生步骤如下：往1ml的小瓶子中加入10ul氨基酸混合溶液(一共18种伯氨氨基酸，各种氨基酸浓度分别为5mM，去离子水配制)，然后加入50ul衍生试剂(40mM邻苯二甲醛和115mM二巯基乙醇混合液，配制时先用1ml甲醇将OPA溶解，然后加入0.1M硼砂(pH9.50)定容至10ml)，再加入100ul硼砂溶液（0.1M，pH9.50），将溶液混合均匀后，观察了3各小时，一直没有看到颜色的变化。
我还尝试过加入pH10.00、10.50、11.00的硼砂溶液（0.1M），仍然没有看到颜色的变化。并检测了衍生时混合溶液的pH值，pH值都大于9。
我不知OPA与氨基酸反应是否有颜色出现，或者我的衍生步骤存在错误，还是OPA失效？
急盼啊！

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杰斐逊

第1楼2006/05/22

直接上机分析，不就知道了吗

0

zhangqiyi_1022

第2楼2006/05/22

原来做过记得有，不过最好亲自试一下。

0

singli

第3楼2006/05/23

谢谢了！
我进样试试看

0

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