【求助】不同时间配制的流动相为何会导致保留时间的不同

保留时间的不稳，我觉得可能有以下2个原因吧：
1、泵的不稳定造成，你可以查看下泵杆的密封垫是否磨损，如果泵杆密封垫磨损，有可能会造成保留时间的不稳，给测定带来麻烦
2、溶剂体系的原因，保留时间其实是化合物在溶剂体系中线团蜷曲程度的反应，不同的溶剂体系中，化合物的蜷曲程度不同，导致保留时间不同，即使是在同一溶剂体系中，由于不同批次的溶剂有可能会有细微的差别，溶剂的挥发，溶剂的多少也是一个原因
综上所述，建议你1、查看下泵杆的密封圈是否磨损2、每次配制溶液，使用或配制同一批次同一质量分数的溶液。

我换不同的仪器，相同的流动相混匀方法，相同的配制人。也是如此。

个人感觉与流动相变化关系很大。

有微小变化正常啊
LZ所说的情况不是泵的问题
每次配制流动相所加的溶剂的量都会有所差别，导致了保留时间的改变
只要保留时间稳定就可以了

依据以前的申报资料，保留时间应该在20.5MIN左右，现在做的话，17分，23分，甚至30分钟都有可能出现，真是很头痛啊。

这种离奇的事我也碰到过，我们以前的一个产品是usp29标准，流动相是甲醇：乙腈：缓冲液，每次严格按照标准配制，每种溶剂精确量取，混匀，抽滤，超声处理，仪器和色谱柱不变可是每次保留时间相差很大从20-28分钟都有出现，仪器新的A1200做其他产品没有问题，好在后来usp30改为梯度洗脱，保留时间那个准，相差不超过1分钟。我一直也没弄明白怎么回事。。。。。。。

我们用的就是梯度洗脱。

楼主，每次配置的流动相，都不可能是完全的一致的：如乙腈、缓冲液等加的是不是完全一致，缓冲液的pH值是不是完全一样等，只要有少许的差别，都会在保留时间上体现，只要差别不大且稳定，都是可以的。
但是，若确如楼主所言，每次的差别达5、6分钟，甚至10几分钟，就需要查找原因了：
1.所配置的缓冲液的pH值，要尽可能的一致；量取缓冲液要使用量筒或量杯精确计量，不可以估计。
2.加入的乙腈体积也要使用量筒进行量取，不可以使用试剂瓶上的标示容量计量（如，标示500ml的试剂，实际上可能只有420~480ml，一般都是少些，不会多）。
3.若楼主也都是按照1.2.方法进行的，接下来就需要，查查乙腈的问题：最好每次配置的流动相都使用同一个批号、同一个厂家试剂；对于更换不同批次乙腈时，若有条件的话，最好走一下气相色谱或者液相色谱，看看本批次和上批次有多大的差别。若差别很大，就说明试剂有问题。另外，配置缓冲液的水的质量问题，也要关注的。
4.实验室环境温度的变化大，也会造成保留时间的差别，不过应该不会造成这么大的差别的。

应助达人

任何人都不可能两次配出一样的流动相，还有保留时间还受到柱温，泵稳定性等影响。