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【求助】急!!求大家帮帮忙,作分子荧光不出峰

分子荧光光谱



  • 各位请帮帮忙,本人采用LS55作荧光测试时,激发峰在256nm处,发射峰应该在614处,可是每次作峰都在600左右移动。参数设置是
    Instrument Parameters
    Measurement type:    Wavelength scan
    Scan mode:    Emistion
    Data mode:    Fluorescence
    EX WL:    256.0 nm
    EM Start WL:    300.0 nm
    EM End WL:    700.0 nm
    Scan speed:    500 nm/min

    EX Slit:    2.5 nm
    EM Slit:    2.5 nm
    PMT Voltage:    800 V

    EMCorr:    Off
    并且还加了1%T的滤光片

    在测试过程中发射峰的位置随激发峰位置的不同(256,280,300nm)等总是在500nm,600nm左右变化,是不是说出现的峰不是我的发射峰,那怎样设置条件才能测出发射峰呢。请大家帮帮忙
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  • loyaldavis

    第1楼2009/03/26

    原则上来说 对于大多数的样品,荧光发射峰与激发光的波长无关 因为荧光是分子本身的属性。
    建议你选择更长一些的激发光波长,其他的峰目前来看有可能是有多个发射峰多导致。

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  • emma09

    第2楼2009/03/27

    可是激发峰我都试过300nm,350nm,每次得到的发射峰都不在同一个位置,就像图中从第二个峰开始都是每次变化激发峰得到的不同位置的发射峰

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  • fragr

    第3楼2009/03/29

    建议其他型号光谱仪测量后对比,找出原因。

    也许是光谱仪的灵敏度,或者是材料的发光效率太低了。

    亦可以请仪器公司的专业工程师给建议。

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  • emma09

    第4楼2009/03/30

    已经在别的仪器上作过啦,在别的仪器上就能测出4条发射峰,条件也都试过啦,还是不行,并且我已经把仪器上测试可更改的条件都更改过啦,还是不出峰,问过工程师也不太懂,因为没有具体的应用工程师,所以都不知道为什么

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  • wxf_167

    第6楼2009/04/08

    看来PE的荧光也不是太好啊!我用国产的荧光做我的课题也没见出过这种奇怪的问题!从谱图上看,500nm左右的应该属于激发256nm的二级衍射峰

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