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【求助】关于流动相和NSI

  • coffee424907
    2009/05/06
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 我现在的流动相是A---ACN 5%, 水 95% 和0.05% TFA
    B---ACN 80%, 水 20% 和0.04% TFA,
    在采用NSI的情况下(已经考虑调整电压和喷头位置等情况),当流动相B的比例在低于60%时,喷头总是断断续续出现气泡和液滴,喷雾状况差,信号断断续续(出喷雾时信号强度还可以,但喷雾就是不连续),咨询技术支持说只能用纯有机相冲,但是冲完再做样品时还是遇到同样的情况;
    在此想请问朋友们在不影响液相对成分的分离效果情况下(我做的是复杂多肽的分离)流动相的组成方面是否可以做些修改,比如添加某些特殊物质,使其尽量少产生气泡,提高喷雾的连续性?

    最新进展
    非常感谢各位有液质联用经验的朋友提供的建议!
    我更换了流动相:A---5% ACN, 95% 水和 0.1% FA;B---95% ACN,5% 水和 0.1% FA
    我用B冲洗了15min后在40min内使B从100%梯度降低至0,之后一直维持A为100%,我注意观察了近20min,喷雾偶尔会有暂停,总体情况比之前好多了;
    然后我又走空样,按平时正常的梯度做了一个循环,在B梯度升高、维持、降为0之后,喷雾也还能维持得不错(离子注入时间值和信号强度值都挺不错)
    现在我想重复几个空样循环,看它是否仍然稳定
  • 该帖子已被版主-zhufangwei加3积分,加2经验;加分理由:能写问题的最新进展是好样的
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  • 论坛版主招募|新窦

    第1楼2009/05/06

    NSI纳喷电离源,没用过这种的,所用的流速是不是极低的?

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  • coffee424907

    第2楼2009/05/06

    比正常的ESI等的流速是要低,有人推荐1ul/min, 我们实验室基本都是用0.3ul/min。

    capinter 发表:NSI纳喷电离源,没用过这种的,所用的流速是不是极低的?

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  • 风之彩

    第3楼2009/05/07

    是不是Nano spray ion source?
    没有用过,这么低的流速。
    只能给点我们用ESI时的经验,不一定用的上。这样的情况,喷雾/信号不稳定,首先看看离子源有没有堵,然后调整质谱的雾化参数,比如源温、气流、喷雾电压、离子源位置等等。
    你的流动相蛮特别的,是查的文献吗?

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  • coffee424907

    第4楼2009/05/07

    非常感谢你的回答!

    我用的就是nano spray ion source,如果不能对流动相成分做改变,那就只能慢慢调了!

    我现在做的是复杂多肽的分离,文献里见过有这么用的,你有何见解,欢迎讨论!

    juju11 发表:是不是Nano spray ion source?
    没有用过,这么低的流速。
    只能给点我们用ESI时的经验,不一定用的上。这样的情况,喷雾/信号不稳定,首先看看离子源有没有堵,然后调整质谱的雾化参数,比如源温、气流、喷雾电压、离子源位置等等。
    你的流动相蛮特别的,是查的文献吗?

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  • 风之彩

    第5楼2009/05/07

    你用的是梯度吗?
    你那个流速向对于你的这个比例会不会太高,而导致喷雾不稳定?

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  • dickwang2008

    第6楼2009/05/07

    优化一下质谱参数,将电压值增高,气流开大些,看看可行不

    coffee424907 发表:我现在的流动相是A---ACN 5%, 水 95% 和0.05% TFA
    B---ACN 80%, 水 20% 和0.04% TFA,
    在采用NSI的情况下(已经考虑调整电压和喷头位置等情况),当流动相B的比例在低于60%时,喷头总是断断续续出现气泡和液滴,喷雾状况差,信号断断续续(出喷雾时信号强度还可以,但喷雾就是不连续),咨询技术支持说只能用纯有机相冲,但是冲完再做样品时还是遇到同样的情况;
    在此想请问朋友们在不影响液相对成分的分离效果情况下(我做的是复杂多肽的分离)流动相的组成方面是否可以做些修改,比如添加某些特殊物质,使其尽量少产生气泡,提高喷雾的连续性?

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  • coffee424907

    第7楼2009/05/07

    是走的梯度洗脱

    比例太高导致喷雾不稳定?

    juju11 发表:你用的是梯度吗?
    你那个流速向对于你的这个比例会不会太高,而导致喷雾不稳定?

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  • 论坛版主招募|新窦

    第8楼2009/05/07

    水相高了喷雾就不连续,喷头总是断断续续出现气泡和液滴,说明没有完全气化,问题应该就出在这里。是否是雾化气流量太小了?可加大雾化气流量及压力试试。

    能否说说你的源设置的参数?

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  • coffee424907

    第9楼2009/05/07

    NSI源参数【符号内为系统默认的源参数值】:
    sheath gas flow rate*(arb): 0 【0】
    aux gas flow rate(arb): 0 【0】
    sweep gas flow rate(arb): 0 【0】
    spray voltage(kV): 2.0 【1.5】(主要在1.3~2.5调试,当水相比例增加、喷雾不好时,电压增加有一定积极的效果,但还是会断断续续的)
    capillary temp(度):160 【200】(主要在160~200之间调试,貌似影响不大)
    capillary voltage(v):37 【9】
    tube lens(v): 100 【100】

    以上源参数除了spray voltage和capillary temp有过一定的调试之外,其它参数没有怎么改动过。

    感谢有经验的朋友继续提供建议!

    capinter 发表:水相高了喷雾就不连续,喷头总是断断续续出现气泡和液滴,说明没有完全气化,问题应该就出在这里。是否是雾化气流量太小了?可加大雾化气流量及压力试试。

    能否说说你的源设置的参数?

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  • 论坛版主招募|新窦

    第10楼2009/05/07

    没有curtain-gas flow参数吗?

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